《抵抗素在膀胱癌發生髮展中的作用及機制研究》是依託四川大學，由張朋擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：抵抗素在膀胱癌發生髮展中的作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張朋
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
膀胱癌是我國泌尿生殖系統最常見的腫瘤，發病率及死亡率均占泌尿生殖系統腫瘤首位，其較高復發率、進展率及遠處轉移率嚴重威脅患者生存率。近年來研究表明，脂肪細胞因子家族如瘦素、脂聯素、抵抗素及內臟脂肪素等與腫瘤的發生髮展關係密切。抵抗素（Resistin）是具有免疫調節功能的脂肪細胞因子，在腫瘤細胞凋亡調控中發揮著重要作用，可能是通過激活PI3K、MAPK或NF-κB通路而參與腫瘤的發生髮展。我們的前期研究證明膀胱癌組織中Resistin表達明顯增加，提示Resistin與膀胱癌的發生髮展密切相關。課題組擬從DNA遺傳變異、蛋白亞細胞定位、mRNA與蛋白表達水平等角度，深入研究Resistin與膀胱癌發生、發展、侵襲與轉移的關係及分子機制。採用質粒轉染及RNA干擾技術干預Resistin的表達，研究其對膀胱癌細胞凋亡或存活的影響及其信號通路，探索干預Resistin表達調控與膀胱癌發生髮展的關係
結題摘要
膀胱癌是我國泌尿生殖系統最常見的腫瘤之一，其發病率及死亡率均占泌尿生殖系統腫瘤首位。抵抗素（resistin）不但參與代謝調節，而且作為一種新型的免疫調節因子參與了機體的大部分炎症反應。本項目研究採用TaqMan SNP分型技術與方法，在膀胱癌患者組及正常對照組樣本中對SNP位點rs1862513及rs10401670進行了群體遺傳性研究，發現rs10401670位點T等位基因顯著降低膀胱癌發病風險（P = 0.03）,CT/TT基因型顯著降低膀胱癌發病風險（P = 0.018）；SNP位點rs10401670的CT雜合子攜帶者早發膀胱癌的風險增加1.97倍。SNP位點rs1862513的CG雜合子比非吸菸患膀胱癌風險增加1.73倍；單因素分析結果表明，SNP位點rs10401670及rs1862513均與膀胱癌患者總體生存、無進展生存不相關。Cox回歸分析結果發現，MIBC患者中rs1862513位點CG雜合子攜帶者腫瘤進展風險顯著減低（P = 0.04）；rs10401670位點T等位基因攜帶者（CT/TT基因型）死亡風險顯著增加2.45倍（P = 0.03），特別是TT純合子，死亡風險增高到3倍（P = 0.02）；ELISA試劑盒檢測血漿resistin表達，發現膀胱癌組血漿resistin表達水平明顯低於正常對照組，有意義的是，與手術前相比，膀胱癌患者術後血漿resistin蛋白表達上調。免疫組織化學及Western blot檢測膀胱癌組織及對照組織中resistin蛋白表達，均發現癌組織中resistin表達顯著增高，qPCR檢測發現組織中RETN基因mRNA表達顯著升高。突變篩查結果在本研究所涉及的332例膀胱癌患者中未篩查到新突變位點。野生型RETN-pcDNA™3.1(+)質粒（WT）及shRNA干擾質粒分別轉染T24細胞，干預RETN表達，採用qPCR技術並結合Western Blot，探討RETN與膀胱癌發生髮展的分子機制，結果發現：shRNA干擾質粒組與WT過表達組比較，shRNA成功抑制了resistin表達，且p38、p44及NF-κB蛋白表達顯著降低，提示resistin可能通過NF-κB及MAPK信號通路參與膀胱癌的發生髮展。本項目研究的順利完成，為RETN及相關基因的深入研究以及膀胱癌發生髮展分子機制研究提供了新的思路與方向
