《心臟缺血預適應中microRNA-145調控ROCK-1的分子機制研究》是依託山東大學，由張娟擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：心臟缺血預適應中microRNA-145調控ROCK-1的分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張娟
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
缺血性心臟病尤其是急性心肌梗死是危害人類健康最重要的疾病之一，心肌缺血再灌注損傷(I/R)更發生在血管再通後。心肌缺血預適應(IPC)被認為是保護心肌I/R損傷最重要的內源性機制。研究發現，microRNA和ROCK（Rho激酶）均參與了心肌I/R。在心臟I/R中ROCK活性明顯增加，加重了心臟的損傷，但具體到ROCK-1和ROCK-2在I/R中的作用尚未明確。在本研究中，我們擬通過建立體內外心肌I/R和IPC模型，進一步明確：（1）ROCK-1而不是ROCK-2在心肌I/R損傷中起關鍵性的作用；（2）心肌IPC中，miRNA-145參與調節ROCK-1引起的損傷，過表達miRNA-145可以降低心臟I/R中ROCK-1的活性及其表達，從而減輕心臟I/R損傷，並進一步檢測相關炎性因子如NF-κB、ICAM-1、MMP-9、COX-2的表達，以探討心臟I/R的細胞分子機制，尋找治療的新策略。
結題摘要
該項目原計畫通過建立體內外心肌缺血再灌注(I/R)和心肌缺血預適應(IPC) 模型，從蛋白基因水平闡明miRNA-145-5p和ROCK-1（Rho激酶）在其中的作用機制，以進一步探討心臟I/R和IPC的作用機制。在獲得國家青年科學基金項目資助後，該項目進展順利，於2019年發表SCI論文2篇，接收1篇，待發表1篇，明確了在IPC中miRNA-145-5p可通過直接作用靶基因ROCK-1減輕心肌I/R損傷。 本課題採用體外實驗和動物體內研究相結合的方法，運用生物信息學、蛋白質生物化學、細胞生物學等方法與技術，通過基因干預，對miRNA-145-5p調控 ROCK-1基因進行了初步研究。首先我們套用 TargetScan軟體分析發現，miRNA-145-5p所作用的靶基因中包括ROCK-1。我們發現，在I/R中，ROCK-1表達增加，而miRNA-145-5p表達下降；但在IPC中，ROCK-1表達降低，而miRNA-145-5p表達增加；過表達miRNA-145-5p在降低ROCK-1的同時，可明顯降低I/R所致的心肌細胞損傷；下調miRNA-145-5p水平則可導致心肌細胞損傷增加和ROCK-1表達增加。為了進一步驗證我們的結果，我們進行雙螢光素酶驗證實驗，明確ROCK-1為miRNA-145-5p的靶基因。 綜合上述研究結果，本課題為探討心臟I/R和IPC的作用機制奠定了堅實的工作基礎。同時對於microRNAs在心臟I/R的作用提供了重要啟示，我們接下來將進一步研究lncRNAs和microRNAs在心臟I/R和IPC的調控關係。項目資助發表SCI論文2篇，接收1篇，待發表1篇；培養碩士研究生2名，均已取得碩士學位；項目投入經費17.5萬元，支出11.4397萬元，各項支出均與預算相符，剩餘經費6.0603萬元，剩餘經費計畫用於本項目研究後續支出。
