循環纖維細胞通過TSP1抑制創面血管新生及機理研究

《循環纖維細胞通過TSP1抑制創面血管新生及機理研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由李學擁擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：循環纖維細胞通過TSP1抑制創面血管新生及機理研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：李學擁
• 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學

中文摘要

血管新生參與了慢性創面、腫瘤、風濕病等疾病。目前血管新生機理研究局限於分子對血管新生的調控作用，而以這些分子為靶點的藥物在全身套用治療血管新生相關疾病時會引起嚴重不良反應，因而臨床迫切需要進一步研究細胞對血管新生的調控作用以尋找新的藥物作用靶點。課題組前期工作顯示：循環纖維細胞（PBFCs）在體外可以促進血管內皮細胞（VECs）凋亡並抑制其增殖；PBFCs在體內可以抑制創面血管新生；基因晶片結果提示PBFCs通過凝血酶敏感蛋白1（TSP1）發揮上述作用。本項目擬在前期工作基礎上，構建TSP1和TSP1 shRNA腺病毒，採用免疫螢光染色、Western-blot、Real-time PCR等方法，明確PBFCs抑制血管新生的作用，並觀察TSP1在PBFCs抑制血管新生中的作用及其信號轉導機制。本課題有望進一步闡明血管新生的機理，為治療慢性創面、腫瘤等血管新生相關疾病提供新的藥物作用靶點。

結題摘要

血管新生參與了慢性創面、腫瘤、風濕病等疾病。目前血管新生機理研究局限於分子對血管新生的調控作用，而以這些分子為靶點的藥物在全身套用治療血管新生相關疾病時會引起嚴重不良反應，因而臨床迫切需要進一步研究細胞對血管新生的調控作用以尋找新的藥物作用靶點。課題組前期工作顯示：循環纖維細胞（CFs）在體外可以抑制血管內皮細胞（VECs）增殖；CFs在體內可以抑制創面血管新生；基因晶片結果提示CFs通過凝血酶敏感蛋白1（THBS1）發揮上述作用。 本項目擬在前期工作基礎上進行如下研究：進一步明確CFs抑制VECs增殖的作用，並觀察CFs是否抑制VECs遷移；明確CFs抑制VECs增殖是否與THBS1有關；研究CFs抑制VECs增殖的信號通路，重點觀察THBS1下游信號轉導通路及控制VECs增殖的信號轉導通路的改變；明確CFs抑制體內創面血管新生是否與THBS1有關。 項目組的研究顯示：將CFs移植入受體小鼠外周血後，CFs可以遷移到受體小鼠創面肉芽組織內，並明顯移植創面癒合過程中的血管新生；CFs移植還可以抑制受體小鼠Matrigel模型的血管新生；將CFs與VECs在Transwell內共培養時，CFs可促進VECs形成條索樣結構，並抑制VEGF和FGF2誘導的VECs細胞增殖；將CFs與VECs在三維膠原內共培養時，CFs可以明顯抑制VECs管腔形成。這些結果提示：CFs可以在體內及體外抑制VECs細胞增殖及血管新生。CFs不僅可以抑制VECs細胞增殖，還能抑制VECs細胞凋亡。CFs與VECs在Transwell內共培養時，CFs可抑制VECs細胞凋亡；而將CFs與VECs在三維膠原內共培養時，CFs可以阻斷生長因子撤除後引起的VECs管的消退。CFs抑制VECs細胞增殖部分與THBS1有關。將CFs與VECs在Transwell內共培養後，CFs內的THBS1明顯增高，將CFs細胞內的THBS1採用RNAi技術降低後可以部分阻斷CFs對VECs細胞增殖的抑制作用，並可以部分逆轉CFs對小鼠創面癒合模型及Matrigel模型內血管新生的抑制作用。 本項目的研究進一步闡明了血管新生的機理，並可為治療血管新生相關疾病如腫瘤、風濕和增生性瘢痕的疾病提供新的藥物作用靶點和治療思路。