巴氏精子染色診法簡稱巴氏精子染色,採用精子檢查的染色技與組織化學反應之一。
基本介紹
- 中文名:巴氏精子染色法
- 簡介:巴氏精子染色法
- 優勢:區別嗜鹼性及嗜酸性細胞成分並檢查細胞的染色質
- 對象:精子
- 行為:染色
- 意義:精子分析、檢查未成熟生殖細胞
簡介,操作過程,
簡介
可以清晰區別嗜鹼性及嗜酸性細胞成分,並詳細檢查細胞的染色質。 對精子的形態分析、檢查未成熟生殖細胞 ,具有實用的價值。
操作過程
染液製備:
①EA36貯備液:伊紅Y:10g溶於100ml蒸餾水中; 俾士 麥棕色素Y :10g溶於100ml蒸餾水中;亮綠SF:10g溶於100ml蒸餾水中。EA36作用液:按下述比 例配成1000ml染液。伊紅Y25ml;俾士麥棕Y5ml;亮綠SF6.5ml,用95%乙醇加至100 0ml, 內加磷鎢酸2g、飽和碳酸鋰液0.3ml。充分混勻,置於棕色密封瓶內室溫下保存,用前過濾 。
②桔黃G6貯備液:桔黃G結晶10g溶於100ml蒸餾水中,搖勻後將溶液存入棕色瓶內備用 。桔黃G6作用液:G6貯備液50ml,用95%乙醇加至1000ml,染液中加入磷鎢酸0.15g 混勻,室溫貯存。用前濾過。
③Hairis蘇木素,按組織染色法配製。
④Scott:NaHCO33. 5g,MgSO420g,蒸餾水1000ml。精子塗片空氣中自然乾燥,用等量之95%乙醇及100%乙醚液固定30分鐘。嗣後精子塗片入80%、70%、50%乙醇10秒,蒸餾水洗片刻,Harris蘇木素3~ 5分鐘;自來水沖洗鹼化1~3分鐘;醇乙醇分色數秒,自來水洗3分鐘;Scott液4分鐘;蒸餾 水洗一次,入50%、70%、80%、95%乙醇各10秒,桔黃G6作用液2~5分鐘;95%乙醇2次;E A36作用液5~8分鐘;95%、100%乙醇各2次,每次10秒;二甲苯透明封片。
結果: 精子形態清晰,其他脫落細胞著色不同。