富爾根氏核染色法

富爾根氏核染色法是根據席夫氏（Schiff）試劑進行的反應而建立的。席夫氏試劑含有鹼性復紅和亞硫酸，鹼性復紅與亞硫酸結合後，失去醌式結構而變為無色，當DNA經酸作用後生成的醛化合物與席夫氏試劑結合後，使醌式結構恢復，合成一種帶紫紅色的鹼性復紅衍生物。這個染色法對DNA具有特異性。細菌細胞用此法染色後，可在普通光學顯微鏡下觀察到核。

基本介紹

• 中文名：富爾根氏核染色法
• 原理：席夫氏（Schiff）試劑
• 器材：亞硫酸水溶液，席夫氏試劑
• 操作：席夫氏試劑作用30—40分鐘

基本原理

富爾根氏核染色法是根據席夫氏（Schiff）試劑進行的反應而建立的。席夫氏試劑含有鹼性復紅和亞硫酸，鹼性復紅與亞硫酸結合後，失去醌式結構而變為無色，當DNA經酸作用後生成的醛化合物與席夫氏試劑結合後，使醌式結構恢復，合成一種帶紫紅色的鹼性復紅衍生物。這個染色法對DNA具有特異性。細菌細胞用此法染色後，可在普通光學顯微鏡下觀察到核。

富爾根氏染色法主要分兩步：(a)將細菌用1mol/LHCl溫和水解，使DNA中的嘌呤鹼與戊糖分開，放出戊糖的醛基；(b)放出的戊糖醛基與席夫氏試劑作用後呈紫紅色。

所需器材

1mol/LHCl，2%餓酸，Schandiun固定液，亞硫酸水溶液，席夫氏試劑，鋨酸蒸氣瓶；

釀酒酵母。

操作步驟

1．取培養8—10小時的釀酒酵母塗片，室溫下風乾。

2．將塗片置於有2%鋨酸的蒸汽瓶口上，用鋨酸蒸氣固定5分鐘，然後放入加熱至60℃的Schandiun固定液中10分鐘。

3．用水沖洗固定後的標本，然後放在60℃1mol/LHCl中水解8分鐘，水洗。

4．用席夫氏試劑作用30—40分鐘。

5．由席夫氏試劑中取出放在亞硫酸水溶液中洗5分鐘。

6．由亞硫酸水溶液中取出水洗，乾燥後，用油鏡觀察。