家蠶胺基酸轉運蛋白與其抗BmNPV功能的研究

《家蠶胺基酸轉運蛋白與其抗BmNPV功能的研究》是依託江蘇大學，由周陽擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：家蠶胺基酸轉運蛋白與其抗BmNPV功能的研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：周陽
• 依託單位：江蘇大學

項目摘要

昆蟲抗NPV雖然研究多年，但一直未鑑定出抗性基因，申請人利用基因晶片篩選出一種新穎的胺基酸轉運蛋白，該蛋白跟抗性相關，並初步進行了驗證。該基因位於Z染色體，該蛋白相似於SLC32、SLC36和SLC38，屬於SLC家族ß亞族。在多細胞動物中，該亞族有關的內膜轉運蛋白的細胞內的區室化對維持必需胺基酸的細胞內的吸收和代謝過程起非常重要作用。查閱相關文獻，我們猜測篩選出的胺基酸轉運蛋白在抗NPV中起著重要作用。然而，該胺基酸轉運蛋白的基因功能及抗NPV的分子作用機制迄今尚不清楚。本項目擬分析該基因的組織表達分布和表達時相；鑑定在抗性、感性家蠶的基因組序列、cDNA序列及基因調控的差異，最後通過構建轉基因家蠶進一步進行驗證。最終希望鑑定出家蠶抗NPV的基因及闡明抗核型多角體病毒家蠶的抗性分子機理。

結題摘要

胺基酸轉運蛋白是一類調控胺基酸轉運的膜蛋白，參與細胞的各種生理活動。然而胺基酸轉運蛋白在病毒感染尤其是在家蠶BmNPV感染中的作用還未知。本項目前期通過基因晶片研究發現家蠶胺基酸轉運蛋白在抗性家蠶品系NB中高表達，推測該基因在抗BmNPV中起到關鍵作用。本項目為了研究該基因在抗BmNPV中作用，分別設計了過表達和干擾實驗進行功能驗證。定量PCR和western結果表明，家蠶胺基酸轉運蛋白在BmNPV感染的抗性品系NB中明顯比感性品系表達水平高。細胞過表達胺基酸轉運蛋白實驗結果表明在過表達細胞系中能抑制BmNPV增殖。而RNA干擾實驗結果表明抑制胺基酸轉運蛋白表達的細胞中BmNPV增殖顯著增加。這些結果說明了家蠶胺基酸轉運蛋白在抑制BmNPV增殖中起到關鍵作用。後續的研究將更深入的研究家蠶胺基酸轉運蛋白在抗BmNPV增殖的具體機制。