《家蠅cDNA庫的構建研究》是依託四川大學，由翟朝陽擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：家蠅cDNA庫的構建研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：翟朝陽
- 依託單位：四川大學
- 批准號：39470642
- 申請代碼：H2205
- 負責人職稱：教授
- 研究期限：1995-01-01 至 1997-12-31
- 支持經費：5.5（萬元）
項目摘要
家蠅幼蟲經注射培養的大腸桿菌後24小時，將幼蟲勻漿離心提取上清液，溶菌和抑菌實驗證明提取物對微球菌、綠濃桿菌和大腸桿菌等致病菌有抑菌活性，DSS-PAGE顯示有蛋白類物質生成，分子在小較溶菌酶小。同法誘導抗菌基因表達，提取總RNA並純化mRNA，經逆轉錄合成cDNA雙鏈，與相應內切酶消化的噬菌體DNA雙臂連線，用含細胞溶素原的噬菌體包裝蛋白包裝後感染宿主菌Y1090(γ-)，重組噬菌體釋出後用SM液收集。經測定，滴度為10(-)pfu/ml,Xgal和IPTG平板顯示重組率為80%。部分文庫以擴增後的產物保存，另一部分未經擴增。由於昆蟲抗菌蛋白在抗菌抗腫瘤細胞上有潛在的套用價值，適當時將進行家蠅抗菌蛋白cDNA的篩選分離，為表達和轉基因研究做準備。
