姬姆薩染色法

姬姆薩染色法簡稱姬氏染色，是用天青色素、伊紅、次甲藍混合而成的姬姆薩染料對血液塗抹標本、血球、瘧原蟲、立克次體以及骨髓細胞、脊髓細胞等標本進行染色的染色方法。染前用蛋白酶等進行處理，然後再用姬姆薩染液染色，在染色體上，可以出現不同濃淡的橫紋樣著色。姬姆薩染液可將細胞核染成紫紅色或藍紫色，胞漿染成粉紅色，在光鏡下呈現出清晰的細胞及染色體圖像。

基本介紹

• 中文名：姬姆薩染色法
• 外文名：Giemsa staining method
• 別稱：姬氏染色法
• 材料：天青色素、伊紅、次甲藍混合
• 用途：血液塗抹標本、血球、瘧原蟲
• 學科：動物生理學

作用機理

姬姆薩染色液由天青，伊紅組成。染色原理和結果與瑞特染色法基本相同。嗜酸性顆粒為鹼性蛋白質，與酸性染料伊紅結合，染粉紅色，稱為嗜酸性物質，細胞核蛋白和淋巴細胞胞漿為酸性，與鹼性染料美藍或天青結合，染紫藍色，稱為嗜鹼性物質，中性顆粒呈等電狀態與伊紅和美藍均可結合，染淡紫色，稱為中性物質。

PH對細胞染色有一些影響。細胞里各種成分均不蛋白質，因為蛋白質系兩性電解質，帶電荷隨溶液PH而定，在偏酸性環境裡下在電荷增多，易和伊紅結合，染色為偏紅，在偏三性環境裡負電荷增多，易和美藍或天青結合，染色偏藍。所以細胞染色對氫離子濃度十分敏感，染色用正經片一定清潔，要無酸鹼污染。配製頊特液一定用優質甲醇，稀釋染色一定用緩衝液，沖洗一定用水應近中性，不然可導致各種細胞染色反應異常，以致於識別困難，甚至造成錯誤的。

一般性操作技術血塗片製備、細胞染色、顯微檢查、血液病診斷、染色不良。

操作步驟

具體操作步驟： ①滴加姬姆薩染色液A液（0.5〜0.8ml)於塗片上，並讓 染液覆蓋整個標本塗片染色1分鐘；②將姬姆薩染色液B 液滴加於A液上面（滴加之量為A液的2 ~3倍）以洗耳球吹出 微風使液面產生漣漪狀，使兩液充分混合，染色3〜10分鐘； ③水洗（沖洗時不能先倒掉染液，應以流水衝去，以防有沉渣 沉澱在標本上）；④乾燥，鏡檢。

注意事項

(1)染色時間要視何種標本，塗片厚薄，有核細胞多少， 何種細胞及室溫等而定；通常染血液塗片時滴加B液後染1〜3 分鐘即可，染骨髓片則應不少於5分鐘。(2)做骨髓塗片時，因為骨髓纖維蛋白含量較高，凝固較 快，所以塗片過程要快。骨髓不可用草酸鹽抗凝，否則會使血細 胞核變形，核染色質緻密，胞質空泡形成，出現草酸鹽結晶。(3)染液量需充足，勿使染液蒸發乾燥，以防染料沉著於塗片上。(4)做血細胞染色時，當天氣寒冷或濕度較大時，應於 37T溫箱中保濕促乾，以免細胞變形縮小。