大承氣湯調控AR42J細胞凋亡-壞死轉換分子開關的轉化研究

《大承氣湯調控AR42J細胞凋亡-壞死轉換分子開關的轉化研究》是依託四川大學，由陳光遠擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：大承氣湯調控AR42J細胞凋亡-壞死轉換分子開關的轉化研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：陳光遠
• 依託單位：四川大學

項目摘要

轉化研究是將臨床問題與基礎科研相結合以最終解決臨床問題的研究方法。如何防止胰腺凋亡轉換為壞死導致的輕症胰腺炎（AP）向重症轉化，是急需解決的臨床問題。前一項目（30400576）研究發現大承氣湯能誘導腺泡細胞凋亡而減輕炎症反應和病理損傷，但其對細胞凋亡途徑中 Fas/FasL、Bcl-2/Bax、 NO和Caspase-3等分子開關的確切調控作用不清，調控細胞凋亡-壞死轉換以防止輕症AP重症化的藥效物質基礎不明。在前一項目基礎上，著眼於細胞凋亡-壞死轉換的分子開關，運用流式細胞儀和分子生物學方法研究大承氣湯調控離體胰腺AR42J腺泡細胞凋亡-壞死轉換時各分子開關的變化，篩選大承氣湯調控凋亡-壞死轉換的分子靶點；再以此分子靶點研究大承氣湯誘導AR42J凋亡的劑量-濃度-效應關係，篩選大承氣湯調控凋亡-壞死轉換的藥效物質基礎；以大承氣湯防治輕症AP重症化為契機將轉化研究的新方法引入中醫藥研究。

結題摘要

急性胰腺炎病情嚴重程度與胰腺腺泡細胞死亡模式相關，壞死多、凋亡少時病情重；凋亡多、壞死少時病情輕，誘導凋亡、抑制壞死有助於減輕病情。本課題主要研究臨床有效方劑大承氣湯對胰腺腺泡細胞壞死-凋亡影響的機理及其可能的分子開關。我們先研究雨蛙肽處理的胰腺腺泡細胞模型經過大承氣湯複方、單體成分處理前後細胞存活率、細胞凋亡率、凋亡-壞死比率、細胞內反應性氧物質（ROS）水平的變化，發現大承氣湯能通過調節ROS以增加胰腺AR42J細胞的凋亡並減少壞死，從而初步證實大承氣湯複方能調控AR42J細胞壞死-凋亡的轉換。再此基礎上，進一步證實了大承氣湯來源的10個單體成分及其不同配位組合具有調控胰腺AR42J細胞壞死-凋亡轉換的作用，其調控效應是複方＞10個單體＞大黃酸+和厚朴酚+柚皮苷的混合物＞單個單體。最後，研究了柚皮苷、和厚朴酚調控壞死-凋亡轉換的信號通路，其中BAX/BCL-2比值、Caspase-3可能是柚皮苷調控AR42J凋亡-壞死轉換的分子開關；而Cyt C 和Caspase-3可能是和厚朴酚調控AR42J凋亡-壞死轉換的分子開關。正在進行大黃酸調控離體胰腺腺泡雨蛙肽細胞模型的壞死-凋亡轉換的研究。而不同的成分有不同的潛在分子開關，為進一步研究複方調控細胞死亡模式轉換的分子開關，並可能基於這些潛在的分子開關進行藥效物質成分篩選奠定了基礎。