增強子序列

增強子序列是含兩組72bp串聯(順向)重複序列,核心部分為TGTGGAATTAG。增強子是指能使和它連鎖的基因轉錄頻率明顯增加的DNA序列。目前發現的增強子多半是重複序列,一般長50bp,通常有一個8—12bp組成的“核心”序列,如SV40增強子的核心序列是5’—GGTGTGGAAAG—3’。

基本介紹

  • 中文名:增強子序列
  • 核心:TGTGGAATTAG
  • 含義:含兩組72bp串聯(順向)重複序列
  • 舉例:SV40增強子核心序列
簡介,相關研究,

簡介

增強子是指能使和它連鎖的基因轉錄頻率明顯增加的DNA序列。作為基因表達的重要調節元件,增強子序列大多為重複序列,一般長約50bp,適合與某些蛋白因子結合。其內部常含有一個核心序列:(G)TGGA/TA/TA/T(G),是產生增強效應時所必需的。
1981年Benerji在SV40DNA中發現一個140bp的序列,它能大大提高SV40DNA/兔β—血紅蛋白融合基因的表達水平,這是發現的第一個增強子。它位於SV40早期基因的上游,由兩個正向重複序列組成,每個長72 bp。目前發現的增強子多半是重複序列,一般長50bp,通常有一個8—12bp組成的“核心”序列,如SV40增強子的核心序列是5’—GGTGTGGAAAG—3’。

相關研究

觀測位於HPV16 LCR序列YY1結合位點上游的組織特異性增強子序列對YY1蛋白的啟動子P97抑制作用的影響。 方法構建帶有不同長度的HPV16野生株、啟動子遠端YY1位點突變株、啟動子近端YY1位點突變株的5′端LCR缺損序列的螢光素酶報導質粒,以及不同長度的近端YY1/SP1重疊結合位點基因工程突變LCR的螢光素酶報導質粒;將各種質粒轉染到人類子宮頸癌細胞系C33A中,檢測在不同LCR序列的控制下對病毒啟動子P97的活性的影響。 結果去除上游增強子序列後,遠端YY1位點突變的P97激活作用完全消失,近端YY1位點突變的P97激活作用部分喪失。不同長度的近端YY1/SP1重疊位點基因工程突變LCR對P97活性的影響不受上游啟動子序列的控制。 結論YY1蛋白對啟動子P97的抑制效應受位於其上游序列的增強子的控制。
人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型的長控制區(long control region,LCR)為病毒基因轉錄的重要調節區域。在LCR中部有一組織特異性增強子區域,可在上皮細胞內增強病毒早期啟動子P97的活性。增強子是由許多轉錄激活因子的特異性結合位點組成,其中包括有AP1、NF1、Oct1、TEFⅠ等〔1〕。細胞轉錄調節蛋白YY1廣泛存在於上皮細胞胞核內〔2〕,對P97的活性起負性調節作用〔3-5〕。YY1蛋白可通過多種方式對不同的啟動子活性進行正相或負相調節,其機理包括與其它活性蛋白發生蛋白-蛋白間相互作用〔6〕,與其它活性蛋白競爭性結合相應的結合位點〔7〕,通過蛋白與DNA結合引起DNA空間結構的改變〔8〕以及與其它非DNA結合活性蛋白作用後使後者作用於轉錄起始部位〔9〕。
在HPV16 LCR序列上存在有多個YY1特異性結合位點,分布於增強子和啟動子P97之間。由於增強子是由多個轉錄激活因子結合位點構成,因而有可能會參與YY1蛋白對P97的活性抑制作用。我們構建了不同的HPV16標準序列、啟動子遠端YY1位點和近端位點突變的5′端缺損LCR螢光素酶報導質粒,經轉染細胞檢測發現,在除去增強子後YY1結合位點突變引起的啟動子活性增強效應明顯減弱或消失。這表明YY1蛋白對P97的調節作用有賴於上游的增強子序列。

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