基於PPAR通路調節的中藥補氣作用改善心肌缺血機制研究

《基於PPAR通路調節的中藥補氣作用改善心肌缺血機制研究》是依託南開大學，由姜民擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：基於PPAR通路調節的中藥補氣作用改善心肌缺血機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：姜民
• 依託單位：南開大學

中文摘要

補氣法是中醫常用治法之一，常與活血等方法聯合套用治療多種疾病，如何詮釋其科學內涵是中醫藥現代化亟待解決的關鍵問題之一。本課題組前期研究顯示：PPAR通路是益氣活血與活血化瘀兩種治療心肌缺血治法的關鍵差異通路。提示了PPAR通路可能是補氣法分子基礎之一。本項目在中醫理論指導之下以益氣活血代表方劑芪參益氣滴丸及其主要成分補氣藥黃芪為研究對象，建立在體及離體氣虛模型和氣虛血瘀型心肌缺血模型，以調節PPAR通路為切入點，結合反向對接、高通量篩選平台；以及RNA干擾、雷射共聚焦、qRT-PCR、Western Blot、ELISA等現代先進技術，研究二者通過補氣作用治療心肌缺血的物質基礎及作用機制；為科學闡釋補氣法乃至益氣活血法分子機制及探討氣的本質提供科學依據；為明確芪參益氣滴丸、黃芪的藥效物質基礎及作用機制，指導其臨床合理套用提供實驗依據；為提高中醫藥的國際影響力和競爭力做出貢獻。

結題摘要

補氣法是中醫常用治法之一，常與活血等方法聯合套用治療多種疾病，如何詮釋其科學內涵是中醫藥現代化亟待解決的關鍵問題之一。心肌缺血為發病率最高的心血管疾病之一，中醫學認為其屬於胸痹範疇，補氣法亦為其重要治法之一。本項目首先對治療心血管疾病的臨床常用益氣活血方劑-芪參益氣滴丸進行了系統生物學研究，同時對與芪參益氣滴丸共有活血化瘀功效的複方丹參滴丸進行了比較研究，從基因組學角度，分析二方差異，以期探討補氣法在治療心肌缺血中的作用機制。研究結果顯示PPAR 通路為二者關鍵差異通路，進一步的離體實驗也驗證了這一結論。中藥含有的化學成分眾多，但只有被吸收入血的成分才能產生藥效作用。本項目在建立芪參益氣滴丸整體化學物質圖譜基礎之上分別採用計算機虛擬計算、外翻腸囊實驗、Caco-2單層細胞實驗等體外研究的方法，結合體內代謝研究，分析芪參益氣滴丸中源自黃芪的成分吸收情況，實驗結果顯示黃芪甲苷、毛蕊異黃酮等有效成分可以吸收入血發揮藥效作用。在此基礎之上我們套用反向對接方法對黃芪中主要成分與PPAR 通路相關蛋白結合能力進行預測，發現黃芪甲苷、毛蕊異黃酮與多個PPAR 通路相關蛋白結合能力較強。進而我們對人參、白朮、山藥等補氣中藥中的藥效成分與PPAR 通路相關蛋白結合能力進行篩選，發現上述藥物中人參皂苷Rb1、薯蕷皂甙元等成分均與相關蛋白有較強的結合能力，提示上述補氣藥物可以通過調控PPAR信號通路發揮作用，且此作用是多成分、多靶點、多環節共同作用的結果。為驗證這一結論，我們建立了心臟內皮損傷模型，並引入PPAR信號通路特異性阻斷劑，選取黃芪、人參中主要藥效成分，考察其內皮保護作用及其與PPAR信號通路間的關係。實驗結果顯示黃芪、人參中主要藥效成分具有較強的心臟內皮保護作用，且此作用可被PPAR信號通路阻斷劑拮抗，進一步證實了PPAR 通路是中藥補氣作用關鍵通路之一；調節PPAR 信號通路是補氣中藥治療心肌缺血作用機制之一。受本項目資助，現已發表論文6篇，其中SCI收錄4篇；培養博士畢業生1名，碩士畢業生2名。達到了預期研究目標。