基於量子點獸藥多殘留同步分析體系構建

《基於量子點獸藥多殘留同步分析體系構建》是依託中國農業大學，由丁雙陽擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：基於量子點獸藥多殘留同步分析體系構建
• 依託單位：中國農業大學
• 項目負責人：丁雙陽
• 項目類別：面上項目

項目摘要

從動物性食品安全重大社會需求出發，為應對國際貿易中的技術壁壘，進一步擺脫我國在獸藥殘留檢測領域處於跟蹤性研究的被動局面，將半導體材料（量子點）作為螢光標記物，探索獸藥殘留檢測新方法，以期獲得原創性技術。本課題組在已初步建立的量子點直接標記獸藥單克隆抗體，成功實現對牛奶中磺胺異噁唑快速檢測的基礎上，擬選用二抗、親和素、葡萄球菌A蛋白作為靶標，將具有不同螢光特性的量子點，通過其表面特定的官能團（如氨基）與靶標偶聯，進而間接標記獸藥的多抗或單抗，實現多色標記。通過分離純化獲得不同螢光特性的量子點-抗體多色標記物，並以此為螢光探針，根據其螢光強度的變化建立同步分析不同類獸藥多殘留反應體系，實現動物性食品中獸藥多殘留的同時檢測。採用螢光光譜、毛細管電泳及ELISA等多種分析手段，表征量子點-抗體標記物的理化性質和生物活性。本研究還將為量子點套用於其他多組分快速檢測提供新思路。

結題摘要

量子點標記技術在生物分析領域擁有廣闊的套用前景，特別是對多靶標的同步分析。按計畫書要求，我們首先建立了一種同時分析牛奶中多種磺胺類藥物、喹諾酮類藥物和三聚氰胺的多讀出分析方法。採用不同發射峰的量子點分別標記廣譜性抗磺胺類單克隆抗體和抗喹諾酮類單克隆抗體實現對6種磺胺類藥物和11種喹諾酮類藥物的螢光定量檢測。該系統與酶標記的單克隆抗體檢測三聚氰胺法兼容，可以同時檢測單一樣本中18種小分子化合物。這種高通量分析法對喹諾酮類、磺胺類藥物和三聚氰胺的檢測限分別為0.18 ng/mL，0.17 ng/mL和7.5 ng/mL。其次，我們建立了量子點標記的螢光免疫分析法測定牛奶中三聚氰胺含量。與酶聯免疫分析方法和氣相色譜-串聯質譜法相比，該方法在實際樣本檢測時操作簡便，檢測限為3.88 ng/mL，線性範圍為8.72 - 113.10 ng/mL。在此基礎上，我們另外引入“點擊化學”介導的信號擴增方法提高量子點的標記效率。在利用“點擊化學”的疊氮和炔基配體修飾納米金顆粒測定多種樣品中總蛋白質含量後，我們對量子點和抗體分別進行相應的修飾，建立了檢測牛尿中玉米赤霉醇的螢光免疫分析方法。最後，我們以恩諾沙星和血清白蛋白之間的螢光共振能量轉移體系為模型，結合熱動力學和分子對接的結果，探討了廣譜性抗體的識別機制。這為進一步最佳化抗體在量子點表面高效、有序自組裝提供理論依據和技術支持。