《基於模板識別的生物分子感測新技術》是依託復旦大學，由盧建忠擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：基於模板識別的生物分子感測新技術
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：盧建忠
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
申請人研究小組多年來一直致力於化學發光新技術的研究，研究成果已7次發表在國際著名分析化學雜誌《Analytical Chemistry》上，2010年本研究小組首次報導了基於模板識別的化學發光DNA檢測新技術，具有簡單、快速、靈敏度高的優點，尤其適用於短鏈DNA的檢測，發表在2010年9月的《Analytical Chemistry》上。本課題即是以上模板識別新技術的進一步提高和發展，擬以DNA和蛋白質作為研究對象，酶和納米粒子作為標記物，利用化學發光的靈敏度高、線性範圍寬、分析速度快以及儀器設備相對簡單、便宜的特色，構建多種具有創新意義的基於模板識別的化學發光單組份和多組份DNA及蛋白質檢測新技術。本課題擬構建的新型模板識別化學發光新技術，能夠很容易拓寬至RNA等物質的檢測，因而具有廣泛的用途，將有助於促進光化學生物分子感測器技術的發展。
結題摘要
特定序列DNA分析近年來一直吸引著各國學者的關注，檢測方法涵蓋了電化學法、比色法、螢光法、化學發光法和同位素法等。DNA分析中經常採用的檢測方式為夾心反應模式，非常適用於24個鹼基以上目標DNA序列的檢測。2010年本研究小組首次提出並報導了基於模板識別的化學發光DNA檢測技術，發表在2010年9月的《Analytical Chemistry》上。 按照原定計畫，本課題以DNA和蛋白質作為研究對象，酶和納米粒子作為標記物，構建了多種具有創新意義的基於模板識別的化學發光生物分子檢測技術。主要包括以下內容：（1）構建了基於模板輔助識別的血小板衍生化生長因子（PDGF）檢測技術；（2）構建了基於模板輔助識別的雙酶標記的DNA雙組分化學發光檢測技術以及聚苯乙烯微球放大檢測技術；（3）探索了金納米粒子模板識別檢測技術，進行了金納米粒子與常規酶標記物的對比分析研究，隨後採用量子點作為標記物，偶合鏈式擴增反應，構建了高靈敏度的模板輔助識別DNA檢測技術以及兩種microRNA分子同時檢測技術，並拓展至PDGF量子點螢光檢測以及量子點自組裝雙組份DNA檢測；（4）構建了基於xMAP流式螢光的雙組份microRNA模板識別技術。在上述金納米粒子工作的基礎上，拓展構建了汞離子高靈敏度化學發光分析技術以及腺苷適配體檢測技術；偶合雜交鏈式反應，構建了聚苯乙烯微球雙重放大型免標記化學發光DNA檢測技術以及構象轉化型microRNA化學發光檢測技術，進而構建了基於xMAP流式螢光的構象轉化型四組分microRNA檢測技術；最後設計了一種新型的硫化氫化學發光探針，並套用於細胞內和活體動物中硫化氫的檢測。 圍繞本課題，在國際一流分析化學雜誌＜＞上發表論文3篇，＜＞4篇，《Analytica Chimica Acta》2篇、《Analytical and Bioanalytical Chemistry》和《Luminescence》各1篇。此外，模板識別PDGF檢測技術的構建為課題主要研究內容，但在該課題2012年1月1號正式啟動前，已在2011年8月1日出版的Analytical Chemistry上發表，未標註本基金資助。基於本課題，現已培養博士研究生4名，碩士研究生4名。
