基本介紹
- 中文名：基因捕獲法
- 定義：利用隨機插入突變進行基因敲除
- 缺點：只能剔除在Es 細胞中表達的基因
- 優點：節省大量費用
定義,優缺點,
定義
基因捕獲法是利用隨機插入突變進行基因敲除的新型方法。通常基因捕獲載體還包括一個無啟動子的報導基因，通常是neo 基因，neo 基因插入到ES 細胞染色體組中，並利用捕獲基因的轉錄調控元件實現表達的ES 克隆可以很容易地在含G418 的選擇培養基中篩選出來，從理論上講，在選擇培養基中存活的克隆應該100%地含有中靶基因。中靶基因的信息可以通過篩選標記基因側翼cDNA或染色體組序列分析來獲得。]
優缺點
用常規方法進行基因敲除研究需耗費大量的時間和人力，研究者必須針對靶位點在染色體組文庫中篩選相關的染色體組克隆，繪製相應的物理圖譜，構建特異性的基因敲除載體以及篩選中靶ES 細胞等，通常一個基因剔除純合子小鼠的獲得需要一年或更長的時間。面對人類基因組計畫產生出來的巨大的功能未知的遺傳信息，傳統的基因敲除方法顯得有些力不從心。因此，基因捕獲法應運而生，利用基因捕獲可以建立一個攜帶隨機插入突變的ES 細胞庫，節省大量篩選染色體組文庫以及構建特異打靶載體的工作及費用，更有效和更迅速地進行小鼠染色體組的功能分析。
此方法的缺點是只能剔除在Es 細胞中表達的基因．單種的細胞類型中表達的基因數目約為I04，現在的基因捕獲載體從理論上來講應能剔除所有在ES細胞表達的基因，因此，在ES 細胞中進行基因捕獲還是大有可為的。用基因捕獲法進行基因剔除的另一個缺點是無法對基因進行精細的遺傳修飾，
