噬菌體抗體庫技術

噬菌體抗體庫項技術是抗體庫技術的一個突破性進展,它在篩選時檢測的不是細菌克隆的可溶性表達產物,而是噬菌體載體轉化細菌後,融合表達在噬菌體顆粒表面上的Fab 或scFV。稱為噬菌體抗體。通過多輪的抗原吸附-洗脫-擴增,最終篩選到的所需的抗體克隆,從而大大簡化了篩選過程。篩選到的噬菌體抗體克隆可套用插人琥珀突變子及不能通讀琥珀突變的受體菌獲得可溶性的Fab 或scFV。

Burton 等將人的抗體編碼基因克隆到噬菌體中並以工程菌表達出人的抗體活性片段(Fab),其抗原中和能力
竟比人的自然抗體高出1000倍以上。表面表達的噬菌體抗體庫運用了雙相表達載體,即在基因克隆過程中載體以兩種形式出現,即噬菌體形式和噬粒形式。噬菌體系統完全模擬了人的B細胞系統,不同的噬菌體針對不同的抗原,編碼抗體的基因在其內,所表達的蛋白質在其外。
噬菌體抗體庫(全套抗體庫),可實現單抗的人源化、小型化和多功能化,而且理論上若構建一個足夠大容量的全套抗體庫,便可從中篩選出抗任何抗原的單克隆抗體,因此噬菌體抗體庫的有效表位(指用任何抗原或半抗原都能從中篩選出相應抗體結合片段)的多樣性直接影響其實用性。噬菌體抗體即在噬菌體表面表達有抗體分子Fab或單鏈抗體的單鏈噬菌體(或稱纖絲狀噬菌體,最常見的如M13),這種表面表達是通過Fab或單鏈抗體與單鏈噬菌體外殼蛋白(P或P)形成融合蛋白而完成的。

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