《單核細胞增生性李斯特菌一新基因組島功能解析》是依託揚州大學，由殷月蘭擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：單核細胞增生性李斯特菌一新基因組島功能解析
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：殷月蘭
- 依託單位：揚州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
單核細胞增生性李斯特菌(LM)是人獸共患李斯特菌病的病原菌，所引發的感染具有較高死亡率。血清型4b的李斯特菌LM XYSN是本實驗室從獄凳暴發李斯特菌病的綿羊腦中分離的高致病力菌株，經前期全基因組測序和比較基因組學分析，發現該菌株存在一個由潛在毒力相關基蘭棵淋因構成的25kbp基因組島。本研究擬在對該基因組島結構特徵分析的基礎上，構建基因組島、潛在毒力相關基因缺失的突變株和回復株，通過生物學特性的測定及體內外感染實驗，對其功能特性進行研究。以腦內皮細胞系、腸上皮細胞係為體外感染模型，藉助顯微觀察及免疫學測定等技術，對其與細胞的互作效記和戶應進行測定。以小鼠和綿羊為體內感染模型，藉助臟器細菌載量、免疫組化測定等技術，對細菌在體內地消長規律、組織定位及病理變化進行測定。基因組島功能的解析，能有效地揭示其在高致病力李斯特菌中的作用，有助於闡明高毒力菌株的致病機制及遺傳演化規律。
結題摘要
李斯特菌屬由19個種構成，但只有單核細胞增生李斯特菌和伊氏李斯特菌具有致病性，其中單核細胞增生李斯特菌是重要的食源性人獸共患李斯特菌病的致病菌。本項目旨在對引起山雄譽汗羊李斯特菌病暴發的分離株的一新基因組島的功能進行研究。經比較基因組學分析，發現該基因組島與伊氏淚己永李斯特菌的毒力島2（LIPI-2）高度同源, 推測伊氏李斯特菌LIPI-2的一部分，即GI9通過水平基因轉移的方式插入XYSN基因組中，進而推動XYSN菌株的進化。在此基礎上，本研究構建了基因組島敲除突變株以及該基因組島中smcL缺失株和重組菌株，以Caco-2BBE細胞系和C57BL/6小鼠進行了體內外感染試驗，結果表明，smcL基因能增強譜系Ⅰ菌株NTSN和譜系Ⅱ菌株EGDe侵襲腸道的能力，具有誘鞏籃煉祖導宿主細胞早期凋亡的功能；該基因組島的敲除顯著降低了XYSN的體內感染能力。本研究揭示了XYSN新獲得的基因組島為致病島，在突破腸道屏障、體內定殖中和增強其毒力中發抹漏危海揮重要作用。
