《哺乳動物細胞重組蛋白工程》是2020年化學工業出版社出版的圖書，作者是王天雲、賈岩龍、王小引。
基本介紹
- 中文名：哺乳動物細胞重組蛋白工程
- 作者：王天雲、賈岩龍、王小引
- 出版社：化學工業出版社
- 出版時間：2020年
- 開本：16 開
- 裝幀：平裝-膠訂
- ISBN：9787122370167
內容簡介,作者簡介,目 錄,
內容簡介
《哺乳動物細胞重組蛋白工程》圍繞建立哺乳動物細胞高效表達體系所需的關鍵技術，從哺乳動物細胞、基因工程、載體工程、細胞工程、培養基最佳化、培養工藝和重組蛋白的分離及純化、分析鑑定、重組蛋白糖基化修飾與控制、重組抗體高效表達與質量控制以及重組蛋白技術產品的研究開發與管理等方面詳細介紹了哺乳動物細胞重組蛋白工程相關的理論和技術。本書內容反映了近十年來哺乳動物細胞重組蛋白工程領域的*進展，可作為生物製藥相關專業本科生、研究生及從事生物製藥的廣大科研工作人員的參考用書。
作者簡介
王天雲，博士，教授，博士生導師。新鄉醫學院“太行學者”特聘教授。河南省重組藥物蛋白表達系統國際聯合實驗室及生物創新藥物工程技術研究中心主任，中國生物化學與分子生物學會理事，河南省生物化學與分子生物學會理事長，教育部“長江學者”，國家科技進步獎評審專家。主持國家自然科學基金4項，省重大科技專項1項，創新傑出人才項目1項；參與國家“863”課題、國家重大科技專項各1項。獲省科技進步二等獎2項、三等獎1項。申請國家發明專利35項，已授權16項。發表研究論文86篇，其中SCI收錄53篇，被引1076次。長期從事哺乳動物細胞表達系統的研究，建立了國際水平的哺乳細胞表達系統，包括高效表達載體、細胞系及培養基。已實現技術轉移2項，專利轉化8項。
目 錄
第一章 適合重組蛋白表達的哺乳動物細胞1
第一 節 CHO細胞表達系統 3
一、CHO細胞歷史與分類3
二、CHO細胞表達系統的優點 10
三、CHO細胞培養 13
第二節 HEK293細胞表達系統 17
一、HEK293細胞的分類與優點 17
二、HEK293細胞培養與鑑定 19
第三節 其他哺乳動物細胞 21
一、人源化細胞系 21
二、非人源化細胞系 23
參考文獻 24
第二章 基因工程28
節 基因工程簡介 28
一、基因工程概念 28
二、基因工程的發展史 29
三、基因工程的套用和基因工程醫藥的前景 32
第二節 哺乳動物細胞基因工程 35
一、目的基因獲取 36
二、載體系統37
三、DNA的體外重組 45
四、重組DNA的轉化 49
五、重組DNA的篩選與鑑定 49
六、目的基因的表達 50
參考文獻 52
第三章 載體工程55
節 表達載體元件的最佳化56
一、啟動子 56
二、增強子 66
三、多聚腺苷酸尾 67
四、內含子 67
五、內部核糖體進入位點和F2A 68
六、選擇標記69
七、翻譯與分泌最佳化 69
第二節 染色質調控元件 71
一、核基質附著區 72
二、遍在染色質開放元件75
三、絕緣子 75
四、穩定抗阻遏元件 76
第三節 靶基因整合 77
一、位點特異性重組系統77
二、基於核酸酶和DNA修復途徑的位點特異性整合 79
第四節 非靶向轉基因整合 80
一、轉座子 80
二、慢病毒載體 80
參考文獻 81
第四章 轉染與篩選 87
節 細胞轉染87
一、細胞轉染的原理 87
二、細胞轉染方法 88
第二節 細胞轉染後的篩選 93
一、瞬時轉染與穩定轉染93
二、穩定細胞系的篩選 94
三、CHO細胞加壓篩選 99
四、HEK293細胞表達系統 102
參考文獻 106
第五章 基因組編輯與細胞工程 108
節 基因組編輯技術 109
一、概念 109
二、常用的基因組編輯技術 109
第二節 CRISPR/Cas9技術在哺乳動物細胞中的套用 117
一、基因的破壞 119
二、位點特異性基因整合120
三、基因激活或抑制 120
四、基因組水平目的基因敲除的篩選121
五、基因編輯套用實驗設計 121
六、脫靶分析124
第三節 CHO細胞工程 125
一、目的基因126
二、細胞工程常用技術 131
