台盼藍拒染法是利用台盼藍只能將死細胞染成藍色而活細胞不能被染上的方法檢測細胞存活率的一種快速簡便的方法。
基本介紹
- 中文名:台盼藍拒染法
- 簡介:台盼藍拒染法是利用台盼藍只能將
- 染色原理:正常細胞具有完整的細胞膜結構
- 流程:將對數生長期的細胞濃度調整為
染色原理,流程,注意事項,
染色原理
正常細胞具有完整的細胞膜結構,而死亡的細胞其細胞膜結構被破壞。台盼藍無法通過正常的細胞膜因而正常的細胞不被台盼藍染上,而死細胞則可被台盼藍染成藍色。
流程
(1)將對數生長期的細胞濃度調整為1~10×10細胞/ml,按10~10個細胞接種於96孔板,每孔100 μl;
(2)培養細胞24小時後,對其進行不同處理,每個處理設三個平行對照;
(3)收集細胞,經台盼藍染色,在倒置顯微鏡下計數藍染及不染色細胞,計算細胞存活率;
(4)結果統計:
鏡下觀察,死細胞被染成淡藍色,而活細胞拒染。
根據下式求細胞活力:
活細胞率(%)= 活細胞總數/(活細胞總數+死細胞總數)×100
注意事項
台盼藍染細胞時,時間不宜過長。否則,部分活細胞也會著色,會干擾計數。