《可控性上調ACE2和Ang-(1-7)靶向性防治低氧性肺動脈高壓的研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由劉曼玲擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：可控性上調ACE2和Ang-(1-7)靶向性防治低氧性肺動脈高壓的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：劉曼玲
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
肺血管收縮和結構重建是低氧性肺動脈高壓(HPH)的病理生理學基礎。已知的擴血管藥物雖能有效降低肺動脈壓，但缺乏特異性，長期服用外周血壓下降使病人難以耐受。ACE2和Ang(1-7)有舒血管抗增殖特點，故促進其表達是防治HPH的有效方法。問題是如何使ACE2和Ang(1-7)根據低氧程度只在在肺血管中高表達。鑒於Tie2在肺血管內皮細胞(ECs)特異性表達，且低氧 (PaO2不低於35mmHg)時HIF-1α僅在肺血管表達增加。故本項目利用Tie2定位於肺血管ECs的特異性、HIF-1α的低氧條件性表達和ACE2與Ang(1-7)舒血管抗增殖的特點，以ACE2和Ang(1-7)為目標基因，分別構建HRE增強的Tie2啟動子驅動ACE2和Ang-(1-7)表達載體，使ACE2和Ang(1-7)特異性可控性地在ECs中高表達，進而調控肺動脈平滑肌細胞，抑制低氧性肺血管收縮和結構重建。
結題摘要
低氧時肺血管收縮和肺血管重建是造成肺動脈壓力增高，誘發肺源性心臟病的關鍵因素。促進ACE2和Ang-(1-7)的表達有利於改善肺內腎素-血管緊張素(RAS)系統的功能異常，抑制低氧性肺動脈收縮和肺血管結構重建。但是常規給藥途徑缺乏特異性，有降低體循環血壓的副作用，而且長期、單一擴張肺血管，可導致靜脈血摻雜，加重低氧血症。故本項目利用Tie2表達定位於肺血管內皮細胞的特異性、HIF-1α的低氧條件性表達和ACE2與其主要產物Ang-(1-7)具有舒血管、抗增殖的特點，分別構建HRE增強的Tie2啟動子驅動的ACE2和Ang-(1-7)表達載體，使ACE2和Ang-(1-7)只特異性定位於肺血管中，根據低氧的程度可控性的表達增多。實驗結果表明，在細胞水平上這二個表達質粒只在ECs上高表達，具有內皮細胞的特異性，並且可以按照低氧的程度使得ACE2和ANG1-7表達增加。同時含有這二個質粒的ECs上清液能夠按照低氧的程度抑制PASMCs中低氧所致的ACE2和ANG1-7的減少，並且明顯抑制低氧所致的PASMCs的增殖。在器官水平，我們製備內皮完整的三級肺小動脈環，將含有這二個質粒的ECs上清液加入到血管浴槽中去，能夠明顯舒張肺小血管環，減輕低氧所致的收縮反應；使用 Mas 受體阻斷劑A-779後，ECs上清液舒血管作用被抑制。在動物水平，我們合成了pAAV-HRE-TIE2-FC-rACE2/ pAAV-HRE-TIE2-FC-ANG1-7的腺相關病毒，以滴鼻方式在低氧14d給大鼠做治療，28d後我們發現這二個病毒可以明顯減輕低氧所致的RVSP、RV/(LV+S)%、WA%和WT%等指標的增高，抑制肺小動脈管腔狹窄，降低大鼠肺內的Renin、Renin receptor、ACE、AT1Ra、AT1Rb的表達，增加ACE2和Mas的表達，增加ANG1-7的含量，並且只在肺組織中檢測到了ACE2和Ang-(1-7)的增加。綜上所述，本項目構建HRE增強的Tie2啟動子驅動的ACE2和Ang-(1-7)表達載體，可以使ACE2和Ang-(1-7)靶向性、可控性地在低氧的肺血管ECs中高表達，進而調控PASMCs，抑制肺血管的收縮和結構重建，糾正肺內RAS系統的異常亢進，起到防治HPH的作用。
