卵巢組織冷凍移植小鼠模型的子代安全性研究

《卵巢組織冷凍移植小鼠模型的子代安全性研究》是依託四川大學，由汪燕擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：卵巢組織冷凍移植小鼠模型的子代安全性研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：汪燕
• 依託單位：四川大學

項目摘要

疾病和性腺毒性治療可以導致女性卵巢早衰。卵巢組織冷凍移植技術是保存和重建卵巢功能的重要手段。我們前期改良了卵巢組織冷凍載體，提出了效率更高、凍存效果更好的玻璃化冷凍新方法（NIV法）。由於卵巢組織冷凍過程中的各種體外因素會對生殖細胞造成影響，可能導致後代潛在的健康風險。目前對於卵巢組織冷凍移植技術的子代安全性問題尚缺乏研究。本項目擬採用NIV玻璃化冷凍法和傳統程式化冷凍法建立小鼠卵巢組織同種異體移植模型，篩選出可供研究的子代小鼠，觀察出生缺陷，運用表觀遺傳學的研究方法對關鍵印記基因甲基化水平進行檢測；同時運用蛋白組學的研究方法對子代小鼠的重要臟器（腦、心臟、肝臟）蛋白表達進行差異性分析，通過與正常妊娠和新鮮卵巢組織移植組子代小鼠對比，初步探討兩種主要的卵巢組織冷凍技術的子代安全性問題。本項目首次從後代安全性角度對卵巢組織冷凍技術進行評估，為改善和最佳化女性生育力保存技術提供研究基礎。

結題摘要

疾病和性腺毒性治療可以導致女性卵巢早衰。卵巢組織冷凍移植技術是保存和重建卵巢功能的重要手段，常用冷凍方法主要為程式化冷凍和玻璃化冷凍。我們前期改良了卵巢組織冷凍載體，提出了效率更高、凍存效果更好的玻璃化冷凍新方法（NIV法）。由於卵巢組織冷凍過程中的各種體外因素會對生殖細胞造成影響，可能導致後代潛在的健康風險。目前對於卵巢組織冷凍移植技術的安全性問題尚缺乏研究。本項目採用了NIV玻璃化冷凍法和傳統程式化冷凍法建立小鼠卵巢組織同種異體移植模型，篩選出可供研究的子代小鼠，觀察子代生長發育、重要臟器解剖及形態分析，並對子代小鼠腦和肝臟關鍵印記基因甲基化H19/igf2r, Snrpn、Plagl1水平和基因表達量進行檢測，通過與正常妊娠和新鮮卵巢組織移植組子代小鼠對比，探討兩種主要的卵巢組織冷凍技術的子代安全性問題。得出結論：小鼠卵巢組織玻璃化冷凍與程式化慢速冷凍相比，移植後卵巢功能恢復更快；誕生子代小鼠發育情況、行為和組織臟器形態分析，冷凍組與對照組相比無明顯差異，新生鼠死亡率冷凍組高於新鮮組，兩個冷凍組均有發現存活至成年發育畸形小鼠。通過對生長發育關鍵印記基因的甲基化水平檢測和差異表達檢測發現：冷凍組移植後代腦和肝臟組織存在H19基因印記區甲基化丟失，igf2r、Snrpn基因甲基化水平增高，Plagl1基因印記區甲基化水平四組無明顯差別。冷凍組H19基因mRNA水平降低，兩個冷凍組之間無差別。本項目首次從後代安全性角度對卵巢組織冷凍技術進行評估，為改善和最佳化女性生育力保存技術提供研究基礎。