半定量PCR

半定量PCR,是指從傳統的PCR定性分析方法基礎上發展起來、能夠測定目標產物相對數量的PCR技術。傳統的PCR分析方法通過以DNA或cDNA為模板進行擴增,來確定目標產物的存在與否。而半定量PCR是首先通過確定目標物PCR有限擴增至最大值的最低循環數,進而比較不同樣品之間該目標物的PCR擴增產物數量,以此確定樣品中目標物的相對數量。是常用的一種簡捷、特異的定量DNA和RNA檢測方法。

不足之處主要有:難以確定PCR是否正處於線性擴增範圍內(只有在此範圍內PCR產物信號才與初始模板的拷貝數成比例);線性擴增範圍確定以後,如何找到一個合適的方法檢測結果;大多數是終點檢測,即PCR到達平台期後進行檢測,重現性差。由此獲得的定量準確度有限,因此,只用於粗略地估計目標基因表達水平的研究。

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