《利用RNAi技術研究豬TLR7在抗PRRSV感染中的作用》是依託揚州大學，由宋紅芹擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：利用RNAi技術研究豬TLR7在抗PRRSV感染中的作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：宋紅芹
- 依託單位：揚州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
TLR7經配體活化後，可引發一系列信號轉導通路，導致炎性介質的釋放，激發機體的天然免疫應答，在機體抗病毒感染方面發揮重要作用。但類似研究僅限於人類醫學等，在動物醫學還未見有TLR7參與抗病毒感染直接證據的報導。本項目選用對我國養豬業危害嚴重的豬繁殖與呼吸綜合徵病毒（PRRSV）為對象，採用RNA干擾的方法，在體外沉默豬肺泡巨噬細胞TLR7基因的表達；比較TLR7基因沉默前後的肺泡巨噬細胞抗PRRSV感染活性以及在TLR7配體咪喹莫特（R-837）刺激下產生細胞因子的差異；另外，比較表達豬TLR7基因的猴腎細胞（MARC-145）與正常MARC-145細胞兩者之間抗PRRSV感染活性的變化情況，從而闡明豬TLR7分子在抗PRRSV感染中的作用，為豬繁殖與呼吸綜合徵新型疫苗免疫佐劑的研究奠定基礎，亦為基於Toll樣受體配體新型疫苗的創製提供新知識、新途徑。
結題摘要
本項目成功構建出表達豬TLR7基因GFP融合表達載體pTLR7-EGFP以及表達豬TLR7基因的MARC-145細胞系，並在細胞模型上篩選出有效干擾豬TLR7基因表達的miRNAs（amiRTLR7-3和amiRTLR7-5）。在構建出表達amiRTLR7-3重組腺病毒的基礎上，發現重組腺病毒有助於豬繁殖與呼吸障礙綜合徵病毒（PRRSV）的感染，同時，表達豬TLR7基因的MARC-145細胞系具有抵抗PRRSV感染的作用。本項目闡明了豬TLR7分子在抗PRRSV感染中的作用，為豬繁殖與呼吸綜合徵新型疫苗的研究奠定了基礎。
