《利用庫存紅細胞自身eNOS合成NO的可行性研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由王全立擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：利用庫存紅細胞自身eNOS合成NO的可行性研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：王全立
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
以往一直認為庫存血的形態學和生化指標變化是輸血引發局部組織供血不足和缺血再灌注損傷的原因。但即使輸用新鮮血液也會出現上述情況，說明還存在另外的貯存損傷機制。據最近的文獻報導和我們前期研究表明，血液在貯存過程中一氧化氮（NO）的迅速耗竭、喪失低氧性血管舒張的功能是其主要原因，對庫存血重新亞硝基化可以恢復此功能，但該措施有悖於血液製備貯存的操作常規。為此，我們提出利用庫存紅細胞自身的一氧化氮合酶（RBC-NOS）合成NO。在現有的血液保養液中加入NO的合成底物L-精氨酸和NOS激動劑ATP並確定其劑量-效應關係。採用螢光免疫、免疫印跡、免疫共沉澱等技術方法研究RBC-NOS與RBC其他蛋白質之間的相互作用，闡明RBC-NOS合成NO的可能的信號通路，為後續的體內外功能試驗奠定基礎，為保持低氧性血管舒張功能的新型血液保養液的研製提供思路，為提高庫存血質量和臨床輸血的安全性和有效性提供技術保障。
結題摘要
觀察了加入L-精氨酸後庫存紅細胞eNOS的磷酸化水平和血管舒張作用。懸浮紅細胞被存儲在4°C，分別在 0 d、 7 d、 14 d、 21 d、 28 d 和 35 d後進行測試。WB 和免疫螢光實驗證實紅細胞膜上 存在NOS ，其濃度和活性水平在整個血液貯存的 35 d內保持穩定。L-NAME抑制庫存紅細胞NO的合成。L-arg（3,30, 300 and 3000 μmol/L） 添加到血液保存液中，顯示與NO的合成呈劑量效應關係（P＜0.01）。L-精氨酸 （3000 μmol/L） 組紅細胞 eNOS的 Ser1177 和 Ser113磷酸化水平都顯著高於對照組，Thr495 的磷酸化水平低於對照組 （P＜0.05）。添加L-精氨酸的懸浮紅細胞顯示比對照組高的血管舒張活性（P＜0.01）。以上結果顯示，L-精氨酸可以誘導Ser1177 和 Ser113的磷酸化，從而增加NO的合成並恢復庫存血乏氧性血管舒張的功能。該項目已經發表核心期刊論文2篇，申報發明專利1項，培養博士和碩士研究生各1名。
