凝膠電泳檢測法

凝膠電冰法檢測或篩選比抗藥性插人失活平板篩選更進步,有些假陽性轉化菌落,如自我連線載體、缺失連線載體、未消化載體、兩個相互連線的載體以及兩個外源片段插人的載體等轉化的菌落,用平板篩選法不能鑑別,但可被電泳法淘汰。這些轉化菌落分離的質粒DNA 分子的大小各不相同,和真正的陽性重組體DNA 相比,前三種的DNA 分子較小,在電泳時的泳動率較大,其DNA 帶的位置位於陽性重組DNA 帶的前面; 相反,後兩種重組DNA 分子較大,泳動率較小,其DNA 帶的位置位於真陽性重組DNA 帶的後面。

電泳法能篩選出有插人片段的陽性重組體。如果插人片段是大小相近的非目的基因片段,對於這樣的陽性重組體,電泳法仍不能鑑別,只有與Southern 雜交結合套用,才能最終確定真陽性重組體。近來,凝膠電泳檢測技術已發展成為凝膠阻滯試驗和DNaseI 足跡試驗,套用非常廣泛。

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