《內源性一氧化氮合酶抑制劑ADMA對血壓及心肌肥厚的影響》是依託西安交通大學，由方媛擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：內源性一氧化氮合酶抑制劑ADMA對血壓及心肌肥厚的影響
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：方媛
- 依託單位：西安交通大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
近年研究證明，血管內皮功能失調是原發性高血壓發生的一個重要病理生理基礎，而一氧化氮合酶(NOS) 活性受抑則可能與鹽敏感性高血壓的發生密切關聯。內源性NOS抑制物-非對稱性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine, ADMA) 能競爭性地抑制NOS,減少NO合成，與血管內皮功能失調相關。動物實驗發現，給予DS大鼠高鹽飲食伴隨血壓升高，尿ADMA的排泌增加；我們近期的試驗結果顯示，給予血壓正常的人群鹽負荷後，鹽敏感者的血漿ADMA顯著升高且與MBP呈正相關關係，而鹽不敏感者的變化不著，提示由鹽攝入導致的NO系統及ADMA的變化可能與高血壓患者鹽敏感機制有關。本實驗以鹽敏感大鼠和自發性高血壓大鼠為研究對象，採用RNA 干擾技術對其ADMA基因進行抑制，觀察ADMA表達變化和血壓及心肌肥厚之間的關係，旨在探討ADMA在鹽敏感性高血壓發生機制中的作用。
結題摘要
經過三年的研究工作，完成了原計畫動物實驗及細胞學實驗的內容，並在其基礎上做了一些拓展性研究。動物實驗分兩部分，第一部分對大鼠進行高鹽、高鹽補鉀干預後測定ADMA-NO系統及其生成代謝相關激酶發現：1. 高鹽組大鼠血壓明顯升高，且伴隨有ADMA生成增多，說明高鹽介導的鹽敏感大鼠血壓升高可能與體內ADMA含量增高、抑制NO生成相關。補鉀干預後，ADMA濃度降低，高鹽對血壓的作用被抑制，說明補鉀飲食可能通過減少ADMA發揮降低血壓和內皮功能保護的作用。2. 高鹽負荷後鹽敏感大鼠血管內皮ADMA生成激酶—蛋白質精氨酸甲基轉移酶（PRMT-I）的表達量高於其高鹽補鉀組（P＜0.05），而其代謝相關激酶二甲基精氨酸二甲胺水解酶-Ⅱ（DDAH-II）的表達量明顯低於正常鹽組（P＜0.05），補鉀可增加DDAH-II的表達（P＜0.05）。說明ADMA生成代謝相關激酶的紊亂是鹽介導血清ADMA水平升高的重要原因，而補鉀可能通過糾正該紊亂逆轉高鹽介導的血壓升高和血管損傷作用。動物實驗第二部分對大鼠進行高鹽、高鹽+肼屈嗪干預後，發現：鹽獨立於血壓之外，對PRMT-I和DDAH-II的生成和代謝有一定程度的影響，從而導致ADMA-NO系統的改變，說明鹽敏感大鼠的內皮功能紊亂由血壓和鹽共同決定，對鹽敏感性高血壓的發生機制有了進一步的闡明。細胞實驗發現：1、高鹽組的細胞上清液中ADMA濃度較對照組明顯升高，而RNA干擾（siRNA）治療後ADMA濃度顯著減少（P＜0.05）；高鹽組細胞上清液NO濃度最低，siRNA治療後NO濃度顯著回升。說明高鹽干預可直接影響細胞ADMA-NO系統的生成，而RNA干擾則可阻斷這一過程。從而在細胞層面上觀察到鹽對血壓作用的相關機制。2、PRMT-1，RhoA和Rock-1 mRNA呈現隨鹽濃度升高而表達增加的趨勢；相反，DDAH-2和eNOS則呈現隨鹽濃度升高而表達降低的趨勢。各指標的蛋白表達與mRNA的表達呈現相似的趨勢。這從ADMA的上游水平說明鹽影響其生成代謝進而影響血壓的機制。3、在RNA干擾方面，高鹽干預+siRNA治療組細胞PRMT-1 mRNA及其蛋白表達明顯下降；RhoA蛋白表達及ROCK-1的活性在siRNA干預組也較對照組顯著降低。說明RNA干擾對ADMA系統的抑制起到了一定作用，從而為高血壓的基因治療治療提供理論依據。
