兔網織紅細胞系統

兔網織紅細胞系統:網織紅細胞無細胞核,其合成的蛋白質90%l 人上為珠蛋白。兔網織紅細胞用活大白兔製備,通過純化除去兔網織紅細胞以外的污染細胞。網織紅細胞裂解後,提取物用微球菌核酸酶破壞內源mRNA,最大限度地降低翻譯背景。裂解物包含蛋白質合成所必須的細胞內組分(tRNA,核糖體,胺基酸,起始、延伸、終止因子)。為了使系統更適於mRNA 的翻譯,兔網織紅細胞中還添加了磷酸肌酸和磷酸肌酸激酶的能量生成系統以及氯化高鐵血紅素防止翻譯起始的抑制,此外還添加了tRNAS 混合物用於擴大mRNA 翻譯的範圍以及乙酸鉀和乙酸鎂等。兔網織紅細胞具有一定的翻譯後加工活性,包括翻譯產物的乙醯化異戊二烯化、蛋白酶水解和一些磷酸化活性。

兔網織紅細胞系統在真核體外翻譯系統套用最廣泛,常用於較大的mRNA 種類鑑定、基因產物性質分析、轉錄和翻譯調控研究,以及共翻譯加工研究等。

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