《先天性心臟病伴肢體畸形拷貝數變異及其致病機理研究》是依託中南大學，由羅成擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：先天性心臟病伴肢體畸形拷貝數變異及其致病機理研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：羅成
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
先天性心臟病是最常見的出生缺陷，也可作為遺傳綜合徵的組成部分，約25%的患者合併其他系統缺陷。其中，肢體畸形是最常見的伴發畸形，尤其以上肢畸形多見。已報導的包括心臟和上肢畸形的綜合徵超過100 種。已知致病性拷貝數變異更多導致伴有心外畸形的先天性心臟病，即綜合徵型先天性心臟病。已有研究在孤立型TOF中發現包括RAF1基因的3p25.2拷貝數重複，指明RAF1基因是TOF的致病基因。已知RAF1基因功能獲得性突變可以使RAF1的表達增強，產生增強RAS-MAPK信號通路的效應，繼而導致RAS-MAPK信號通路病。最近本研究小組通過SNP array晶片技術發現包含核心基因的RAF1的拷貝數微重複可導致法洛四聯症為主的先天性心臟病合併嚴重上肢畸形。同時擬通過構建小鼠相關基因表達異常的生物模型進行遺傳學研究，探討拷貝數變異的致病機理。
結題摘要
先天性心臟病是最常見的出生缺陷，肢體畸形是其最常見的伴發畸形。致病性拷貝數變異更多導致伴有心外畸形的先天性心臟病，即綜合徵型先心病。在孤立型TOF中已發現包括RAF-1基因的3p25.2拷貝數重複，指明RAF-1基因是TOF的致病基因。已知RAF-1基因功能獲得性突變可以使RAF-1的表達增強。RAF-1異常表達能夠影響心臟的發育，導致心臟肥大。RAF-1 L613V型突變與野生型相比具有更強的激酶活性，該突變的小鼠能表現出努南綜合徵的特徵。在突變小鼠中，心肌細胞和心肌成纖維細胞中的MEK和ERK在各種刺激條件下激活增加，顯示RAF-1/MEK/ERK的過度激活。努南綜合徵常常伴隨著一些骨骼的畸形，如面部的比率失調、多指。這些特徵也在RAF-1 L613V小鼠模型中得到證實，提示我們RAF-1的突變可能影響了骨骼的發育。多種刺激引起的各條通路激活的ERK在成骨細胞分化中扮演者重要的作用。也有報導證實RAF-1能夠調控成骨細胞的生長。但這些研究多集中於對RAF-1功能沉默後的觀測，對功能過度激活尚無報導。我們收集到拇指三節指-多指並指畸形綜合徵三代家系1個，其中1人同時合併先心病。研究發現這1例先心病伴上肢畸形患者同時具有2個致病性拷貝數變異，即既有新發7q36.3微重複導致的拇指三節指-多指並指畸形綜合徵，還有新發22q11.21微缺失導致的一種紫紺型先心病。我們隨後的研究發現RAF-1突變影響成骨細胞系MC3T3-E1細胞的成骨分化的作用，miR-195抑制RAF-1的效應及其對MC3T3-E1細胞的成骨分化的影響，進一步證實了miR-195通過與RAF-1直接結合抑制其表達，從而抑制RAF-1誘導的MC3T3-E1細胞的成骨分化激活作用，提示miR-195可能成為基因治療RAF-1 L613V突變的患者骨骼畸形（努南綜合徵）的一種新方法。
