保健食品中綠原酸的測定

前言

本標準由中華人民共和國衛生部提出並歸口。

本標準負責起草單位:中國疾病預防控制中心營養與食品安全所。

本標準主要起草人:楊大進、方從容、王竹天、韓會新、李青。

本標準為首次發布。

本標準規定了保健食品中綠原酸的測定方法。

本標準適用於以金銀花、菊花、杜仲、山植等一種或幾種為主要原料的保健食品中綠原酸的測定。

當取樣量為2.0 g時，定容體積為25 mL時，方法的檢出限(LOD)為1. 4 X 10-2 g/kg，方法的定量限(LOQ)為 4.0 X 10-3 g/kg。方法的線性範圍為2.0μg/mL~80 μg/mL。

根據綠原酸易溶於甲醇、乙醇等極性有機溶劑的理化特性，一般試樣中的綠原酸用70%甲醇提取，如果試樣為油性軟膠囊，可用石油醚脫脂揮乾後再用70%甲醇提取。提取液定容，過濾後進高效液相色譜儀，經反相色譜分離後，由紫外檢測器檢測，根據保留時間和峰面積進行定性和定量。

乙酸(CH₃COOH):優級純。
乙睛（CH₃CN):色譜純。
甲醇(CH₃OH):色譜純。
石油醚:分析純，沸程30℃~60℃。
水(H₂O):為實驗室一級用水，電導率(25℃)為0. 01 mS/m,
綠原酸標準品:純度≥99%。
綠原酸標準儲備液((2.00 mg/mL):稱取綠原酸標準品0.02 g(精確至0.000 1 g)於10.0 mL容量瓶中，加流動相溶解並定容至刻度，混勻(此標準儲備液在4℃冰櫃中，可保存5 d) 。
綠原酸標準使用液(200 μg/mL):準確量取1. 00 mL綠原酸標準儲備液於10. 0 mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，混勻(此標準使用液在4℃冰櫃中，可保存5 d) 。

一般試樣:稱取0.5 g~2 g粉碎均勻的試樣(精確到0.001 g)於25. 0 mL容量瓶中，加人20 mL70%甲醇，超音波提取30 min，用70%甲醇定容至刻度，混勻(如試樣中綠原酸含量較高，可適當進行稀釋)，過0.45μm濾膜，濾液供液相色譜分析。

油性試樣:稱取0. 5 g~2 g均勻的試樣(精確到0.001 g)於25 mL離心試管中，加入15 mL石油醚，振搖1 min後，以3 000 r/min離心10 min，棄去溶劑後再重複一次。將試樣中溶劑揮乾後加人70%甲醇，其餘步驟同上。

液體試樣:以3 000 r/min離心10 min後(如試樣中綠原酸含量較高，可適當進行稀釋)，過0.45μm濾膜，濾液供液相色譜分析。