《低頻脈衝電磁場影響破骨細胞RANK信號通路對CAII的調控機制》是依託廈門大學，由陳健擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：低頻脈衝電磁場影響破骨細胞RANK信號通路對CAII的調控機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：陳健
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
PEMFs是治療骨質疏鬆安全有效的方法，前期我們已證實PEMFs抑制破骨細胞RANK與CAⅡ基因表達且RANK信號通路調控CAⅡ，但該通路如何調控CAⅡ？我們推測PEMFs可能通過影響RANK信號系統經由NFAT2通路介導調控CAⅡ表達。本項目擬(1)構建NFAT2基因沉默大鼠破骨細胞，研究NFAT2對CAⅡ基因表達的調控作用，檢測這些蛋白的表達；以NFAT2調節劑阻斷/激活該通路，研究NFAT2在RANK信號通路的作用；(2)探索在PEMFs作用下破骨細胞RANK信號通路對CAII表達的影響；(3)探討PEMFs對骨質疏鬆症病人RANK、CAII、NFAT2基因表達的作用。通過本研究，將明確RANK信號通路是否通過NFAT2調控CAII表達，明確PEMFs作用下，破骨細胞信號轉導機制。本項目將闡明破骨細胞關鍵信號轉導通路RANK與CAII之間的關係；明確PEMFs治療骨質疏鬆的機制。
結題摘要
骨質疏鬆症（OP）是一種由於人體成骨細胞與破骨細胞失衡引起的功能性疾病。破骨細胞（OC）對骨的過度吸收是骨質疏鬆發病的直接原因。低頻脈衝電磁場（PEMFs）是治療骨質疏鬆的有效治療方法。OPG/RANK/RANKL系統是OC分化的重要信號通路。NFAT2和CAII均為OC表達的重要基因，通過前期研究發現，RANK-RANKL刺激可通過NFAT2調控CAII，從而活化OC。為此，我們首先通過慢病毒轉染，研究NFAT2基因沉默對體外培養OC的NFAT2，CAII，V-ATPase基因表達的影響。結果顯示，NFAT2基因沉默的OC中NFAT2、CAII、V-APase的表達明顯低於OC組，說明NFAT2可調控CAII和V-ATPase基因的表達，從體內實驗中也部分得到驗證。其次，我們通過去勢構建骨質疏鬆動物模型，通過體內和體外干預，發現PEMFs干預的去勢骨質疏鬆大鼠組中RANK和V-ATPase基因表達均低於骨質疏鬆組。最後，在臨床試驗中，我們採用illumina Hiseq2000 測序平台的雙端100bp 測序模式對OP病人進行轉錄組測序，發現OP與免疫存在密切關係。同時，通過PEMFs治療骨質疏鬆患者，通過轉錄組測序，我們發現PEMFs同樣對一些免疫相關基因具有調節作用。總之：我們發現OC中NFAT2對CAII基因表達的調控，證實NFAT2對CAII基因存在調控的機制；PEMFs干預條件下，NFAT2在RANK信號系統的可能作用，闡明了PEMFs對OC的RANK信號系統轉導的調控作用；從基因表達水平研究OP與免疫功能的關係，發現OP的差異表達基因大部分集中在與免疫功能相關的信號通路上。因此，對骨免疫的進一步研究，有助於預防及治療影響骨與免疫系統的一些常見疾病。
