伊紅美藍培養基

原理

當大腸桿菌分解乳糖產酸時細菌帶正電荷被染成紅色，再與美藍結合形成紫黑色菌落，並帶有綠色金屬光澤。而產氣桿菌則形成呈棕色的大菌落。

在鹼性環境中不分解乳糖產酸的細菌不著色，伊紅和美藍不能結合，故沙門氏菌等為無色或琥珀色半透明菌落。金葡菌在此培養基上不生長。

常用的伊紅美藍乳糖培養基，可用來鑑別飲用水和乳製品中是否存在大腸桿菌等細菌。如果有大腸桿菌，因其強烈分解乳糖而產生大量的混合酸，菌體帶H+，故菌落被染成深紫色，從菌落表面的反射光中還可以看到金屬光澤。

用伊紅美藍培養基鑑定水中大腸桿菌

步驟如下：

①製作伊紅美藍培養基，趁熱注入培養皿中，凝成平板，待用。

②用滅過菌的錐形瓶盛取河水或溝水，按1：10稀釋。

③取0.1毫升稀釋液接種於伊紅美藍培養基上。用平板劃線分離法進行分離。

④將劃線後的培養皿倒置37℃溫箱中培養18～24小時。培養基中會出現大腸桿菌菌落，菌落中心呈暗藍黑色，發金屬光澤。

⑤將菌落接種於斜面培養基上（由營養瓊脂培養基製成）。

磷酸氫二鉀 2g

瓊脂 20~30g

2%伊紅水溶液 20ml

0.5 %美藍水溶液 13ml

先將瓊脂加至900ml蒸餾水，加熱溶解，然後加入磷酸氫二鉀及蛋白腖，混勻使之溶解，再以蒸餾水補足至1000ml，調整PH為7.2~7.4。趁熱用脫脂棉或絨布過濾，再加入乳糖，混勻後定量分裝於燒瓶內，置高壓蒸汽滅菌器內以115℃滅菌20min，貯存於冷暗處備用。

將蛋白腖、磷酸鹽和瓊脂溶解於蒸餾水中，校正PH，分裝於燒瓶內，121℃高壓滅菌15min備用。臨用時加入乳糖並加熱溶化瓊脂，冷至50～55℃，加入伊紅和美藍溶液，搖勻，傾注平板。