《以人源化小鼠模型檢測HLA I類分子敲除hES細胞的免疫原性》是依託浙江大學，由鮑磊擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：以人源化小鼠模型檢測HLA I類分子敲除hES細胞的免疫原性
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：鮑磊
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
人胚胎幹細胞（hESC）具有自更新能力和分化多能性，可用作再生醫學的種子細胞。但是免疫排斥嚴重限制了其臨床套用。免疫排斥主要因為供受體間HLA的異質性。B2M是HLAⅠ類複合體的重要組分，對HLAⅠ的組裝和上膜起關鍵作用。本項目擬利用TALEN技術在hESC中敲除B2M基因，使hESC表面的HLAⅠ缺失，進而研究HLAⅠ缺失hESC移植後是否能逃避受體的免疫攻擊。由於人類和小鼠生理及免疫系統的差異，從小鼠體內獲得的人類細胞免疫原性的研究結果可能無法反應人體內的真實情況。因此，本項目也將通過把人類胎兒胸腺和CD34+胎肝細胞移植到免疫缺陷小鼠體內，在小鼠中重建人類免疫系統，並利用由此方法建立的人源化小鼠評估B2M敲除hESC的免疫原性。總之，本項目試圖通過敲除HLAⅠ類分子產生低免疫原性hESC，並建立人源化小鼠模型驗證其在體的免疫原性，使之有望成為再生醫學中可靠的、“普適”的種子細胞來源。
結題摘要
免疫排斥是人胚胎幹細胞（hESC）在再生醫學領域臨床套用的重大障礙。Ⅰ類HLA的異質性是造成同種異體細胞移植免疫排斥的主要原因。 β2-microglobulin （B2M）是HLAⅠ類複合體的重要組分，對HLAⅠ的組裝和上膜起關鍵作用。本項目擬利用TALEN技術獲得B2M敲除即HLAⅠ缺陷的hESC， 並且通過移植人類胎兒胸腺和CD34+胎肝細胞到免疫缺陷小鼠體內建立具有人源化免疫系統的小鼠，進而評估B2M敲除hESC的免疫原性。我們在hES細胞系H1及X1中建立了若干B2M雙拷貝敲除的細胞系，去除了細胞表面的HLAⅠ類分子，並證明B2M敲除後的hESC依然維持其自更新能力，多能性並仍具有正常的核型。 功能研究表明B2M敲除，即HLAⅠ缺陷在體外和體內均顯著降低了hESC的免疫原性。本項目通過敲除HLAⅠ類分子產生低免疫原性hESC，使之有望成為再生醫學中可靠的、“普適”的種子細胞來源。
