人類CB2大麻素受體在桿狀病毒系統表達純化及質譜分析作者是Filppula S，S，名士許R，S，W，Pavlopoulos Yaddanapudi Makriyannis A。
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標題： | 人類CB2大麻素受體在桿狀病毒系統表達純化及質譜分析。 |
作者： | Filppula S，S，名士許R，S，W，Pavlopoulos Yaddanapudi Makriyannis A. |
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摘要： | 的cannabinergic系統中存在的各種器官和組織進行了廣泛的重要的生理功能，使其成為一個固有的藥物發現的重要的治療目標。 大麻素受體（認證機構）及其配體，高效率和有效的工具之間的相互作用，以增加我們的知識是必不可少的魯棒這些膜結合蛋白的表達和純化。 在這份報告中，我們描述了一個合適為淨化人類大麻素受體2（CB2）定性和定量的水平足夠的質譜分析方法。我們利用桿狀病毒表達系統，將多個表位標籤便於純化和標籤CB2的表達和功能上有改善的效果。 表達的蛋白編碼的羧基（C）端His標籤顯示CB2構建一個B 9.3皮摩爾/毫克（最大）值的K（D）7.30 nM的使用[3（H）] CP-55（940） ，一個標準的大麻素的放射性配體，和被選擇用於後續的純化實驗。 Western blot分析純化的膜蛋白幾樁CB2，形式最豐富的是一個41 kDa的肽。觀察到的第二蛋白物種的表觀分子量為46 kDa的糖基化形式的CB2。 此外，CB2的同型二聚體也被確定。純化的受體進行質譜分析，以確認其身份和純度。得到對應於細胞內，細胞外和跨膜結構域的化合物的質譜。 在這些實驗中舉例說明的高水平表達系統的重要性，顯影時的膜結合蛋白的純化策略。這項工作將有助於識別受體 - 配體結合位點，參與受體激活的分子特徵的表征，澄清CB2受體三級結構。 |
注意事項： | Ĵ，PEPT住宅。 2004年12月，64（6）:225-36。相關文章連結250：J PEPT住宅。2004年12月，64（6）:225-36。相關文章連結 |
