《人類新基因RMND5A條件敲除小鼠模型的建立及其功能研究》是依託湖南師範大學，由鄧雲擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：人類新基因RMND5A條件敲除小鼠模型的建立及其功能研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：鄧雲
- 依託單位：湖南師範大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
本課題組克隆了人類新基因MRND5A，製備了人和小鼠RMND5A抗體，對人和小鼠胚胎組織進行的Western雜交表明RMND5A在心臟中高表達；利用果蠅和斑馬魚模型進行的前期研究結果表明，該基因在這些動物中與心臟發育有關，通過生物信息學和免疫共沉澱等技術證明該基因與Smad9相互作用，可能通過BMP信號途徑調控心臟的發育。為了深入研究該基因的功能，本課題組利用Red系統構建了RMND5A打靶質粒，將該質粒線性化後電轉入小鼠ES細胞,已通過Southern雜交篩選獲得了中靶ES細胞。申請人擬在前期研究結果的基礎上建立RMND5A條件敲除小鼠模型，利用原位雜交和免疫組化等技術研究RMND5A基因在胚胎髮育階段的精細時空表達模式及其在心臟發育中的生物學功能，結合細胞模型闡明RMND5A調控哺育動物心臟發育的分子機理，為了解RMND5A在人類心臟發育和疾病發生中的功能奠定基礎。
結題摘要
對於Rmnd5a的生物學功能至今沒有任何報導，我們研究結果表明：Rmnd5a主要表達於心臟、小腸、肝臟、腎等組織，在小鼠發育早期的心臟組織中特異表達；在多種小鼠心肌肥大模型和在PE和10%FBS刺激的大鼠原代心肌細胞中表達上調。體外過表達Rmnd5a能誘發心肌細胞的肥大生長。此外，我們發現Rmnd5a能與Smad7相互作用抑制TGF-β/BMP信號通路。而且在A549細胞系中瞬時過表達Rmnd5a能抑制TGF-β1刺激的P-Smad2 分子的激活、Smad4的入核和細胞遷移。最後，我們發現在心肌細胞中Rmnd5a同樣可以抑制P-Smad2的活化，而且在Smad4敲除的小鼠心臟中表達下調。我們的研究表明，Rmnd5a是TGF-β/BMP信號通路的新的負調控因子，很可能是心肌肥大的誘發者。現已成功獲得基因中靶小鼠，正在進行後續工作。
