《人乳頭瘤病毒特異細胞miRNA對E6/E7基因表達的調控及機制》是依託浙江大學，由謝幸擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：人乳頭瘤病毒特異細胞miRNA對E6/E7基因表達的調控及機制
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：謝幸
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
高危HPV感染是宮頸癌發生的必要因素，病毒癌基因表達調控機制尚未澄清。已有的研究顯示，在HPV病毒癌基因的非編碼區存在調控基因穩定性的調控位點。本研究利用病毒癌基因的非翻譯區，構建重組表達載體，轉染HPV感染的宮頸細胞株，尋找影響癌基因表達的調控位點，再結合網路miRNA預測軟體預測結果，確定miRNA的特異性結合位點。利用miRNA晶片檢測整合型和游離型HPV感染細胞株的miRNA的表達譜，結合軟體預測已確定的特異性結合位點，篩選出能夠作用於病毒癌基因非翻譯區的特異性miRNA。並在體外細胞水平通過調控miRNA觀察miRNA對癌基因表達及細胞生物特性的影響。並且通過報告基因的表達水平檢測觀察非翻譯區參與了miRNA調控基因表達的過程。最後利用臨床標本進行驗證。旨在尋找與病毒整合相關的細胞miRNA,揭示病毒游離/整合相關的miRNA對病毒癌基因的調控及其機制。
結題摘要
高危HPV感染是宮頸癌發生的必要因素，病毒癌基因表達調控機制尚未澄清。已經證實，miRNA參與了許多病毒致病和腫瘤發生過程，提示其也可能在HPV致宮頸癌發生中起關鍵作用。本研究首先利用miRNA基因晶片檢測不同病變宮頸組織中miRNA的表達差異，篩查出不同宮頸病變差異表達miRNA 31個，可能與HPV感染相關miRNA 16個，並完成了miRNA靶基因預測和GO功能分析，建立miRNA-HPV相關基因關係預測網路圖，並在此基礎上進行後續系列miRNAs功能研究，以及miRNA調控病毒癌基因的機制研究；研究發現miR-34a下調是宮頸病變發生中的早發事件，而miR29和miR-100下調參與宮頸癌發生的晚期階段，miR-375的下調錶達則與宮頸癌進展有關。同時miR-375的異常表達與病毒感染及病毒癌基因的表達有密切聯繫。在此基礎上我們依然不懈地在病毒癌基因表達調控與腫瘤發生髮展過程中的作用做進一步的探討。通過本項目研究，明確了與宮頸癌發生不同階段相關的miRNA，揭示了特定miRNA 在致癌過程中的關鍵作用，同時本系列研究中已經發現調控病毒癌基因表達的miRNA, 為進一步完善病毒致癌理論及機制研究提供了研究基礎，miRNA在人乳頭瘤病毒致宮頸癌的發生髮展中具有關鍵的作用，該系列研究從多方面對miRNA與HPV感染、病毒癌基因的表達調控機制以及其在致癌過程中的作用進行了多方位探討，取得了較好的實驗成果，為發現能阻斷宮頸癌發生的新靶點提供了實驗依據。本項目按要求完成，發表SCI論文4篇，申請專利1項，獲得國家級獎勵1項。
