《人乳頭瘤病毒樣顆粒表位的鑑定和中和機制研究》是依託廈門大學，由趙勤儉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：人乳頭瘤病毒樣顆粒表位的鑑定和中和機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：趙勤儉
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
宮頸癌是高危型HPV感染所致，目前的宮頸癌疫苗是通過誘導產生中和抗體的方式來抵禦病毒感染的。HPV的中和抗體與HPV 有著多種的結合方式及對應的中和機制，但基於HPV VLP-中和抗體免疫複合物的空間結構來探索抗原表位和中和機制的功能關係還未見報導。本項目擬首先通過篩選鑑定HPV抗體得到不同類型的中和抗體，利用冷凍電鏡三維重建技術和X射線晶體衍射實驗解析免疫複合物的結構，定位HPV VLP上的各類中和表位並確定其胺基酸組成和結構特徵，然後構建基於表位結構的突變假病毒，利用細胞中和實驗研究HPV VLP作為疫苗的中和機制，闡明HPV VLP表位結構與中和作用的定性和/或定量關係，從而套用於現有疫苗生產的質量控制，並為研製下一代宮頸癌疫苗提供參考和依據。
結題摘要
宮頸癌是高危型HPV感染所致，目前的宮頸癌疫苗可誘導機體產生保護性中和抗體以抵禦病毒的感染，並預防宮頸癌等疾病的發生。已知HPV的中和抗體與其衣殼蛋白有多種的結合方式，但基於HPV VLP-中和抗體免疫複合物的空間結構來探索抗原表位和中和機制的功能關係還未見報導。本項目擬進行研究內容包括：（1）在HPV抗體庫中篩選出不同類別的優勢中和抗體；（2）製備抗原抗體免疫複合物，並進行結構解析；（3）通過分子模建等技術確定中和表位的空間結構和主要的胺基酸組成；（4）基於結構和模建結果，探索該中和抗體可能的中和機制。由於課題評審結果建議為短期研究（一年），並且經費資助改為小額資助（16.0萬元），故評審專家建議研究目標更改為：“加強已獲得中和抗體的生物學鑑定，明確1~ 3種HPV中和抗體的結合位點，以闡明可能的中和機制”。 結題時，通過本課題研究，利用X射線晶體衍射技術解析HPV58五聚體的晶體結構，並採用抗體同源模建獲得結構模型，利用分子對接和相互作用界面分析等，鑑定了HPV58兩種中和抗體的結合位點和作用方式，對指導疫苗設計和下一代的疫苗研究具有指導意義。另外，本研究還發現異源核糖核蛋白hnRNP H對於HPV L1蛋白形成和組裝具有調控作用，並綜述了HPV VLP的結構，組裝和抗原性檢測方法等進展。通過課題的實施，共發表SCI論文3篇，培養1名博士生和3名碩士生。
