二氨基聯苯胺

二氨基聯苯胺（Diaminobenzidine,DAB）是辣根過氧化物酶最敏感、最常用的顯色底物，反應產物因不溶於水、二甲苯和醇的棕色沉澱物而被廣泛地用於蛋白印跡（Western Blot,WB)、免疫組織化學(Immunohistochemistry,IHC)和免疫細胞化學(Immunocytochemistry,ICC)、斑點印跡(Dot blot)和生物晶片(Biochip)等的染色和顯色反應。

基本介紹

• 中文名：二氨基聯苯胺
• 外文名：Diaminobenzidine,DAB
• 保存條件：在-20℃，避光、密封保存
• 化學性質：不穩定

保存條件

試劑盒應在-20℃，避光、密封保存。

使用說明

使用前先用蒸餾水將B顯色液（1:25）稀釋為工作液，然後按比例（1:25）加入A顯色液，混勻後立即使用。顯色時間1-30分鐘，顯色時間過長可引起本底增高，故應密切觀察顯色過程（一般3-10分鐘最理想），並在本底較淺且達到適當顯色強度時以流水漂洗終止顯色反應。

稀釋方法：取去離子水920ul,加入B顯色液40ul混勻，再加入40ul的A顯色液，混勻後即可使用。工作液建議用量：免疫組化50-100ul/切片，WB每張膜200－5000ul/膜

注意事項

1． DAB溶液應低溫密封保存。如有結晶析出，應確保結晶完全溶解再行使用；

2． 顯色工作液應現用現配，新鮮配製的工作液應為無色或淺棕色，如顏色過深，請勿使用；

3． DAB在常溫下不穩定，每次取用後均應及時加蓋密封放回冰櫃，以免因DAB分解影響實驗，或因滲漏造成實驗環境污染；

4． DAB有潛在致突變作用，操作時應注意穿戴好防護用具。