《二分濃核病毒基因組克隆的感染性拯救和病毒載體研究》是依託江蘇大學，由姚勤擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：二分濃核病毒基因組克隆的感染性拯救和病毒載體研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：姚勤
- 依託單位：江蘇大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
二分濃核病毒歸屬2012年ICTV新設立的二分DNA病毒科，它是動物二分體病毒。該病毒基因組結構與細小病毒相似，但基因組不能自引發-滾環複製，至今無法實現基因組克隆的感染性拯救。家蠶二分濃核病毒(BmBDV)是二分濃核病毒代表種，申請者在研究中發現BmBDV基因組複製方式與腺病毒相似。本項目擬以BmBDV為原型，開展二分濃核病毒基因組克隆的感染性拯救和病毒載體研究①研究BmBDV全基因組克隆的病毒拯救，探明BmBDV作為病毒載體潛能；②構建攜帶報告基因的BmBDV重組病毒，查明BmBDV攜帶外源基因的能力; ③研究BmBDV病毒DNA在宿主基因組中的整合性，查清病毒載體對宿主的遺傳影響; ④研究BmBDV病毒載體對非允許細胞的感染性，評價重組病毒的套用及安全。二分濃核病毒兼具細小病毒和腺病毒特質，建立BmBDV基因組感染性拯救方法，能為拓展昆蟲病毒載體以及新型病毒殺蟲劑研究奠定基礎。
結題摘要
家蠶二分濃核病毒（Bombyx mori bidensovirus, BmBDV）是首例二分DNA病毒，該病毒是2012年國際病毒分類委員會(ICTV)新設立二分DNA病毒科的唯一病毒種。BmBDV是可以引發家蠶罹患類似昆蟲濃核症 的一種病毒，其主要侵染家蠶的柱狀細胞。該病毒結構類似細小病毒，但複製方式卻與腺病毒相似，BmBDV 兼具細小病毒及腺病毒雙重特性，具有基因載體和生物殺蟲劑的潛能。但是，BmBDV病毒拯救一直是其套用研究的瓶頸。在“二分濃核病毒基因組克隆的感染性拯救和病毒載體研究”中，項目組找到了BmBDV病毒拯救的新突破點，即構建可恢複線性末端結構的BmBDV全基因組克隆；採用特定酶切使全基因組克隆線性化；共轉染家蠶BmN細胞並採用持續培養和擴大培養的細胞培養方式；實現了BmBDV全基因組克隆的病毒拯救。構建了攜帶GFP報告基因和蠍毒素BmK ITa1的重組病毒，BmBDV病毒載體可以攜帶約1000bp的外源基因。BmBDV病毒DNA不整合在宿主基因組中，病毒載體對宿主不具遺傳影響。 BmBDV病毒載體對非允許細胞缺乏感染性，BmBDV可以作為昆蟲病毒載體；重組病毒具有潛在套用價值，並且是生物安全的。發表具有國際影響力的論文9篇；授權專利2項；申請專利1項。培養分子病毒學青年骨幹教師2名；培養研究生8名；與加拿大、法國、美國的細小病毒領域專家建立了合作；在國內外相關病毒學專業學術大會進行了學術交流。在江蘇大學舉辦了2019年第四屆全國昆蟲病毒學術大會；項目負責人當選國際病毒分類委員會委員。
