《乳腺癌肺轉移相關microRNA的篩選及功能分析》是依託山東大學，由楊其峰擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：乳腺癌肺轉移相關microRNA的篩選及功能分析
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：楊其峰
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
乳腺癌是全球女性最常見的惡性腫瘤之一，復發轉移是導致乳腺癌患者死亡的主要原因，尤以肺轉移發生率最高。近年來，microRNA的出現為腫瘤的研究提供了嶄新的思路，但是目前對於調控乳腺癌發生肺轉移的microRNA卻知之甚少。為找到調控乳腺癌肺轉移的microRNA，我們構建了乳腺癌肺高轉移能細胞系，運用microRNA晶片篩選出與肺轉移密切相關的microRNAs並進行驗證，最終確立了5個候選microRNAs作為我們深入研究的目標。本項目擬通過過表達和干擾microRNA進行體內外實驗，分析其對乳腺癌細胞增殖、浸潤轉移及血管新生的影響，明確其靶基因並探討其分子通路。然後通過檢測相關microRNA在良惡性乳腺組織中的表達情況以明確其臨床套用價值。本課題的完成將有助於闡明乳腺癌進展轉移過程中候選microRNAs所起的作用，也將為乳腺癌肺轉移的防治提供新的靶標。
結題摘要
乳腺癌是全球女性最常見的惡性腫瘤之一，復發轉移是導致乳腺癌患者死亡的主要原因，尤以肺轉移發生率最高。近年來，microRNA的出現為腫瘤的研究提供了嶄新的思路，但是目前對於調控乳腺癌發生肺轉移的microRNA卻知之甚少。為找到調控乳腺癌肺轉移的microRNA，我們構建了乳腺癌肺高轉移能細胞系，並運用microRNA 晶片篩選出與肺轉移密切相關的microRNAs 並進行驗證，確立了5個候選microRNAs 作為研究目標，通過進一步的體內外功能學實驗研究發現其中2個為乳腺癌功能性的miRNAs，即miR-99a和miR-30a。過表達miR-99a以及使沉默miR-99a後的功能實驗表明miR-99a可以顯著抑制乳腺癌細胞的增殖、遷移和侵襲。通過生物學信息綜合分析，我們確定HOXA1 mRNA為miR-99a的直接作用靶點，這種調節作用得到了螢光素酶報告實驗的證實。此外我們首次發現HOXA1在乳腺癌組織中表達量升高。使HOXA1表達沉默可以顯著抑制乳腺癌細胞的增殖、遷移和侵襲；恢復HOXA1的表達可以部分抵消miR-99a對乳腺癌細胞的抑制作用。相比正常乳腺組織，miR-99a在乳腺癌組織中常常呈低表達。MiR-99a的低表達與淋巴結轉移和乳腺癌患者總生存期的縮短高度相關。在體外，在乳腺癌細胞系中過表達miR-30a可以抑制細胞生長和轉移。同時，小鼠移植瘤模型同樣顯示miR-30a可以抑制腫瘤的生長和遠處肺轉移。通過雙螢光素酶報告基因檢測法我們發現，miR-30a通過直接靶向MTDH而抑制乳腺癌的增殖和轉移，miR-30a可以結合到MTDH基因3’ 端的非編碼區，由此抑制MTDH表達。此外，沉默MTDH基因可以模擬miR-30a過表達的效果，而過表達MTDH可以部分削弱miR-30a介導的抑制作用。重要的是，乳腺癌組織的miR-30a的表達水平與配對的正常乳腺組織相比顯著降低。進一步的統計發現，miR-30a的表達與乳腺癌患者的淋巴結和肺的轉移呈負相關。綜上所述，我們的數據表明miR-99a和miR-30a是乳腺癌發展過程中重要的抑癌基因，可以作為乳腺癌的潛在治療靶點。
