中性白細胞活動對胰腺腺泡細胞鈣離子信號的調節

《中性白細胞活動對胰腺腺泡細胞鈣離子信號的調節》是依託北京師範大學，由崔宗傑擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：中性白細胞活動對胰腺腺泡細胞鈣離子信號的調節
• 依託單位：北京師範大學
• 項目負責人：崔宗傑
• 項目類別：面上項目

項目摘要

急性胰腺炎早期的白細胞侵潤，已經經過多年的系統研究並被確認。但是中性白細胞侵潤在急性胰腺炎發生髮展中的細胞和分子基礎，並不清楚。本項目計畫分離大鼠中性白細胞，將分離提純的白細胞與分離的大鼠胰腺腺泡共孵育。研究生理性刺激物觸發中性白細胞呼吸爆發、產生胞外陷阱的特性。研究中性白細胞呼吸爆發、胞外陷阱形成，對分離胰腺腺泡細胞中G蛋白偶聯受體CCK1、M3所引發胞漿鈣振盪的調節作用。鑑別白細胞呼吸爆發、胞外陷阱的成份，對兩種G蛋白偶聯受體功能的影響。作為對照，同時將研究中性白細胞兩種生理過程（呼吸爆發、胞外陷阱）對肝臟實質細胞表面alpha 1型腎上腺素能受體、V1A型血管加壓素受體、P2Y型嘌呤能受體的調節作用。這項研究對於從分子水平闡明中性白細胞侵潤在急性胰腺炎發生髮展中的作用，具有重要意義。潛在地可對急性胰腺炎的早期預防及治療，起到一定的指導作用。

結題摘要

研究了大鼠中性白細胞呼吸爆發、胞外陷阱形成的基本特性。發現fMLP所引發大鼠中性白細胞呼吸爆發，抑制CCK1受體、M3型受體，但對肝臟細胞中alpha1受體、V1A受體、P2Y受體沒有作用。特定強度的呼吸爆發，可在抑制CCK1受體時對M3沒有抑制作用。呼吸爆發的抑制作用，在短時間內不能恢復。分別研究了H2O2, O2-, HOCl, OH., NO, ONOO，MPO對CCK1、M3受體的影響。發現H2O2/O2-可敏化M3受體，但對CCK1沒有影響。HOCl, OH., NO, ONOO, MPO對CCK1受體皆無任何作用。次氯酸對M3受體也沒有影響。研究發現PMA、fMLF、fMIFL、IL-8皆可刺激大鼠中性白細胞形成胞外陷阱，且前三者形成胞外陷阱的能力近似。IL-8刺激大鼠中性白細胞不引起呼吸爆發，但可產生胞外陷阱。研究發現IL-8引發的大鼠中性白細胞胞外陷阱對大鼠胰腺腺泡細胞CCK1和M3受體沒有影響。中性粒細胞主要在胞外產生活性氧或胞外陷阱，肥大細胞主要在胞內產生活性氧。實驗證實激活的肥大細胞對胰腺腺泡細胞、海馬神經元等細胞表面受體沒有明顯調控作用。實驗發現中性粒細胞胞外陷阱主要成分H抑制CCK1及M3受體。但中性粒細胞胞外陷阱成分Y通過R蛋白刺激胰腺腺泡細胞觸發胞漿鈣振盪。研究了Msr在胰腺腺泡細胞、胰腺星形細胞中的表達及亞細胞分布。探討了MsrA在單線態氧激活大鼠胰腺腺泡細胞CCK1R過程的作用。發現過表達Msr後胰腺星形細胞鈣信號發生顯著變化。研究了單線態氧分子對胰腺腺泡細胞CCK1受體的氧化作用，發現單線態氧分子氧化CCK1受體特定Met殘基，進而導致CCK1受體的脫寡聚化及永久性激活。這些結果充分說明大鼠中性粒細胞生理性活動對胰腺腺泡細胞具有多位點、多種化學反應形式的調節。這些成果對於闡述及臨床干預急性胰腺炎的發生髮展，具有重要科學意義。