《中國產NDM-1超級細菌毒力及耐藥傳播分子機制研究》是依託浙江大學，由俞雲松擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：中國產NDM-1超級細菌毒力及耐藥傳播分子機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：俞雲松
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
超級細菌嚴重威脅人類健康，最新發現的產NDM-1超級細菌在全球十多個國家和地區迅速流行，中國也出現了產NDM-1的屎腸球菌和鮑曼不動桿菌。本實驗室已從近年全國18個省市醫院收集的革蘭陰性菌中篩選到16株產NDM-1的不動桿菌（即超級細菌），且分布於全國10個不同地區，因此急需闡明其致病性及造成流行的可能性。本研究將新收集12000株以上革蘭陰性菌繼續篩選產NDM-1超級細菌，套用PFGE、MLST技術進行克隆分型，揭示我國超級細菌主要流行克隆；採用小鼠感染模型比較流行克隆的毒力差異；通過對攜帶NDM-1基因的質粒進行接合、轉化實驗、酶切圖譜分析以及DNA全序列測定，明確耐藥質粒的播散途徑及同源關係，闡明耐藥基因所處的遺傳環境，探索其快速傳播和流行的可能原因和分子機制。對NDM-1型超級細菌毒力及耐藥傳播機制的研究有助於了解耐藥菌全球快速播散的本質，為尋求控制策略提供基礎。
結題摘要
NDM-1型碳青黴烯酶是2009年發現的一種新型金屬β-內醯胺酶，該酶具有對頭孢菌素及碳青黴烯類抗生素的高效水解活性；至今產NDM-1酶菌株已經呈全球範圍播散，成為嚴重威脅人類健康的“超級細菌”。但是目前我國NDM-1菌株的流行病學數據缺乏，blaNDM-1基因迅速播散的機制仍不明確。本課題對2009年1月至2010年9月間收集的12024株革蘭陰性桿菌進行blaNDM-1基因的篩查。結果發現13株不動桿菌屬細菌攜帶有該基因，提示我國此間產NDM-1酶的主要細菌為不動桿菌屬細菌。通過S1-PFGE聯合Southern blot雜交、質粒接合實驗及轉化實驗、酶切克隆和PCR mapping以及第二代高通量測序技術，我們發現blaNDM-1基因均定位在序列結構相似的可轉移性質粒上，位於轉座結構Tn125中，從而明確了ISAba125是介導blaNDM-1基因在不動桿菌屬不同菌種間傳遞的主要轉移結構，揭示了不動桿菌屬細菌是blaNDM-1基因進入腸桿菌科細菌的關鍵中間環節。另外，本課題在對2013-2014年新收集的菌株進行的耐藥基因篩查時，進一步分離到6株blaNDM-1陽性腸桿菌科細菌，提示該基因近兩年已經開始在我國播散。6株腸桿菌科細菌的blaNDM-1基因均定位於IncX3型可轉移性質粒上。通過對質粒進行高通量測序以及生物信息學分析，我們進一步揭示了ISAba125可能攜帶blaNDM-1基因從不動桿菌屬細菌跨種屬水平轉移到腸桿菌科細菌中的規律。本課題首次對國內blaNDM-1基因的流行病學特徵進行了研究，解釋了產NDM-1菌株迅速引起全球播散的原因，也警示我們blaNDM-1基因所能造成的潛在威脅，有助於了解耐藥菌全球快速播散的本質，為尋求控制策略提供基礎。
