一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用

《一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用》是廣州陳李濟藥廠於2010年3月30日申請的專利，該專利的公布號為CN101791341A，授權公布日為2010年8月4日，發明人是莫國強、郭鐘慧、何風雷、李卓璐。

《一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用》是關於一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用，所述中藥組合物包含以下重量份配比的原料藥：狗脊600份、黑老虎360份、千斤拔144份、桑寄生180份、女貞子30份、雞血藤360份、金櫻子192份、牛大力240份、菟絲子30份。該發明發明從給藥後動物的組織計量學、生物力學以及試驗中測試的眾多指標綜合分析，能對骨質疏鬆症有明顯的治療作用。

2018年12月20日，《一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用》獲得第二十屆中國專利獎優秀獎。

基本介紹

• 中文名： 一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用
• 公告號：CN101791341A
• 授權日：2010年8月4日
• 申請號：2010101395024
• 申請日：2010年3月30日
• 申請人：廣州陳李濟藥廠
• 地址：廣東省廣州市廣州大道南1688號
• 發明人：莫國強、郭鐘慧、何風雷、李卓璐
• Int.Cl.：A61K36/738(2006.01)I; A61K36/758(2006.01)I; A61K9/20(2006.01)I; A61K9/48(2006.01)I
• 代理機構：廣州新諾專利商標事務所有限公司
• 代理人：華輝
• 類別：發明專利

專利背景

骨質疏鬆症是以骨量減少，骨的微觀結構退化為特徵，致使骨的脆性增加以及易於發生骨折的一種全身性骨骼疾病。隨著社會老齡化進程，骨質疏鬆症的發病率逐年升高。據中國流行病學調查報告，骨質疏鬆症50歲～60歲發病率為21％，60歲～70歲發病率為58％；尤其是絕經後婦女，骨質疏鬆症和骨折併發症發病率更高，男女比率約1:8。骨質疏鬆症主要分為原發性和繼發性兩大類。原發性骨質疏鬆是由於年齡增加或婦女絕經後骨組織發生的一種生理性變化。因某些疾病（如內分泌紊亂鈣吸收障礙等慢性疾病）、營養不良及藥物誘發的骨質疏鬆稱為繼發性骨質疏鬆症。

中國國內外治療骨質疏鬆症通常採用鈣製劑或雌激素替代療法。但鈣製劑大多吸收不好或吸收後鈣磷不能在骨骼中沉積。雌激素替代療法，能直接改善絕經後婦女骨代謝，有效地防止絕經後頭幾年骨的進行性丟失，但短期服用，其療效難以持久，長期服用容易導致各種併發症（如乳腺癌、子宮內膜癌等）。

發明內容

專利目的

《一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用》的目的是為了提供一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用。

技術方案

《一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用》所述中藥組合物包含以下重量份配比的原料藥：

狗脊600份	黑老虎360份	千斤拔144份
桑寄生180份	女貞子30份	雞血藤360份
金櫻子192份	牛大力240份	菟絲子30份

製備方法為：取狗脊、雞血藤、金櫻子、千斤拔、黑老虎（木部）加水煎煮二次，合併煎液，濾過，濾液濃縮成稠膏；黑老虎（皮部）與其餘桑寄生等四味粉碎成粗粉，加入上述稠膏，混勻，乾燥，粉碎成細粉，過篩，混勻；加入輔料製成臨床上可接受的劑型。

《一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用》所述中藥組合物還可以是由以下重量份配比的原料藥組成：

狗脊600份	黑老虎360份	千斤拔144份
桑寄生180份	女貞子30份	雞血藤360份
金櫻子192份	牛大力240份	菟絲子30份
延胡索26份	兩面針26份	乳香12份
沒藥20份

製備方法：取狗脊、金櫻子、雞血藤、千斤拔、黑老虎（木部）加水煎煮二次，濾過，合併濾液，濃縮成稠膏；其餘牛大力等八味及黑老虎（皮部）共粉碎成粗粉，加入上述稠膏，混勻，乾燥，粉碎成細粉，過篩，混勻；加入輔料製成臨床上可接受的劑型。

上述治療骨質疏鬆症的藥物劑型可以是丸劑、膠囊劑和片劑。

改善效果

經藥效學試驗表明，《一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用》所涉及的中藥組合物對老齡去勢老齡SD大鼠骨質疏鬆症均有一定的提高骨質疏鬆大鼠血清鈣、磷含量的作用，提高骨形成指標鹼性磷酸酶，降低骨吸收的指標羥脯氨酸、抗酒石酸酸性磷酸酶的作用；骨生物力學試驗也表明壯腰健腎丸高劑量組雄性大鼠左側股骨彎曲試驗中最大荷載有增加的趨勢；從骨組織計量學看，能明顯提高雌性大鼠骨小梁面積百分比及骨小梁的厚度。

因此，從給藥後動物的組織計量學、生物力學以及試驗中測試的眾多指標綜合分析，能對骨質疏鬆症有明顯的治療作用。

技術領域

《一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用》涉及一種屬於中藥製劑用途領域，具體涉及一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用。

權利要求

1.《一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用》特徵在於：所述中藥組合物包含以下重量份配比的原料藥：

狗脊600份	黑老虎360份	千斤拔144份
桑寄生180份	女貞子30份	雞血藤360份
金櫻子192份	牛大力240份	菟絲子30份

2.根據權利要求1所述的中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用，其特徵在於：所述中藥組合物還包含以下重量份配比的原料藥：

延胡索26份	兩面針26份
乳香12份	沒藥20份

3.根據權利要求1或2所述的中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用，其特徵在於：所述治療骨質疏鬆症的藥物劑型可以是丸劑、膠囊劑或片劑。

實施方式

《一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用》所涉及的中藥組合物是得到國家食品藥品監督管理局批准的壯腰健腎丸和舒筋健腰丸。壯腰健腎丸是由以下重量份配比的原料藥組成（在《一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用》實施例中，重量份的單位是克）：狗脊600克、黑老虎360克、千斤拔144克、桑寄生180克、女貞子30克、雞血藤360克、金櫻子192克、牛大力240克、菟絲子30克。舒筋健腰丸是由以下重量配比的原料藥組成：狗脊600克、黑老虎360克、千斤拔144克、桑寄生180克、女貞子30克、雞血藤360克、金櫻子192克、牛大力240克、菟絲子30克、延胡索26克、兩面針26克、乳香12克、沒藥20克。

• 藥效學試驗

1.試驗方法

劑量設計：根據其臨床擬用法用量，該專題選用壯腰健腎丸低劑量1.0克/千克、壯腰健腎丸高劑量3.0克/千克，舒筋健腰丸低劑量1.35克/千克、舒筋健腰丸高劑量4.0克藥丸/千克進行藥效學篩選（壯腰健腎丸、舒筋健腰丸低、高劑量組按等效劑量折算法均約相當於成人臨床日用量的1、3倍）。

陽性藥選用已上市的仙靈骨葆膠囊，該藥是在貴州民間驗方的基礎上發掘整理而成的苗族藥，該產品療效明確，銷售狀況良好，故選用其為陽性對照藥。給藥劑量為1.0克/千克（均按藥丸計，按等效劑量折算法約相當於成人臨床日用量的4倍，臨床人用最大劑量為3克/天）。

以上各組給藥途徑均為灌胃給藥，給藥容積均為15毫升/千克。

2.分組與給藥

試驗選用檢疫合格11-12月齡SD大鼠分為7組：除偽手術組外，其餘大鼠行去勢手術後2周按體重進行隨機均衡分組：模型對照組，陽性藥組（仙靈骨葆膠囊），壯腰健腎丸高、低劑量組，舒筋健腰丸高、低劑量組。

各組在檢疫期結束後施行去勢手術：雌性大鼠：切除雙側卵巢及輸卵管；雄性大鼠：摘除兩側睪丸。

偽手術組：僅切除包裹卵巢的一小團脂肪組織。

除偽手術組、去勢模型組給予等量蒸餾水外，其餘各組每天給藥一次，該試驗給藥周期設為連續給藥12周。

3.動物的末次處理

試驗結束前大鼠禁食一夜，次日上午用10％水合氯醛腹腔注射麻醉動物（擬定劑量為3.0毫升/千克，具體的劑量麻醉人員可以根據動物的情況作相應的調整）腹主動脈採血製備血清，採血後儘快分離血清。血清樣本在-20℃保存待測。血清用於測定血清鈣（Ca）、磷（IP）、鹼性磷酸酶（ALT）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）、羥輔氨酸（HOP）、骨鈣素等指標。採血後腹主動脈放血處死大鼠，製作骨標本：取下大鼠左右股骨，脛骨，除淨附在骨上的肌肉和軟組織。取脛骨在室溫下，於4％福馬林中固定用於骨組織計量學的檢測，其餘骨標本製取後用生理鹽水紗布包裹，置於-20℃低溫冰櫃保存待測。

4.統計分析方法

由於考慮到12月齡的雌性大鼠與雄性大鼠體重相差太大，相應的雌雄大鼠之間骨指數、生物力學及組織計量學應該進行雌雄分開統計，而血清生化指標由於雌雄之間差異較小，故合併進行統計。統計時所有數據均輸入EXCEL2003統計軟體進行相應的統計處理，各組計量數據均採用表示。

• 對SD大鼠血清生化指標的影響

1.試驗

從-20℃冰櫃中取出動物末次處理後保存的血清，分別檢測血清鈣（Ca）、血清磷（IP）、鹼性磷酸酶（ALP）、肌酐（Cre）活性：採用生化自動分析儀測定。血清抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）及羥脯氨酸（HOP），血清骨鈣素根據試劑盒使用說明書測定。

該試驗骨吸收的指標選血清抗酒石酸酸性磷酸酶（StrACP）及羥脯氨酸（HOP），骨形成的指標選血清鹼性磷酸酶及骨鈣素。

2.結果（附表1）

附表1.壯腰健腎丸、舒筋健腰丸對老齡去勢大鼠血清生化指標的影響

附表1

與模型對照組相比，表示p＜0.05，表示p＜0.01。

試驗結果表明：該實驗中與偽手術組相比，模型組大鼠血清鈣、磷水平稍低於偽手術組，壯腰健腎丸、舒筋健腰丸高劑量均有一定的提高骨質疏鬆大鼠血清鈣或血清磷的作用，推測壯腰健腎丸、舒筋健腰丸高劑量可能是通過提高鈣、磷水平途徑從而增加骨的強度。

與模型對照組相比，壯腰健腎丸高劑量組血清羥脯氨酸、抗酒石酸酸性磷酸酶明顯減少，鹼性磷酸酶明顯升高，骨鈣素亦有增加的趨勢；舒筋健腰丸高劑量組抗酒石酸酸性磷酸酶明顯減少，鹼性磷酸酶明顯升高，上述試驗結果提示，壯腰健腎丸、舒筋健腰丸高劑量組均具有一定的降低骨吸收的作用和提高骨形成的作用。

• 對SD大鼠骨組織計量學的測定

1.材料與儀器

病理圖像分析軟體：Image-ProPlus6.0，編制單位：MediaCybemetics公司。

2.骨病理片的製作

對於動物末次處理後的脛骨，骨病理片採用脫鈣法製作。製作方法如下

①取右側脛骨近端1/3，室溫置於10％福馬林中固定24小時，流水沖洗24小時後移入10％EDTA溶液中脫鈣，至骨組織無氣泡發生或軟化為宜，或用大頭針輕輕能刺進為度，自來水沖洗24小時（脫鈣過程注意避光），②然後轉入70％酒精內脫水3小時，再以80％酒精脫水3小時，90％、95％酒精三次脫水各1小時，100％酒精三次脫水各1小時，③投入苯甲酸甲酯中透明過夜，浸石蠟50分鐘包埋，④切片厚度5微米。⑤H-E染色。

3.結果

在顯微鏡下可見偽手術組的脛骨近端骨小粱較為密集，互相連線成立體網狀，骨小梁表面光滑，骨小粱的間距小，而模型對照組動物的骨小梁大多數表現為：骨小梁數量明顯減少，骨小粱排列稀疏.骨小梁之間的間隙增寬，骨髓腔擴大，並出現骨小梁的空缺區域。骨小粱粗細不均.有較多的骨吸收陷窩，部分區域的骨小粱出現斷裂、殘端游離，骨小粱的連線中斷，三維結構受到破壞。偽手術祖及去勢大鼠骨小梁之間的間隙中均有較多的脂肪細胞。試驗結果（附表2、3）：

附表2.壯腰健腎丸、舒筋健腰丸對老齡去勢雌性大鼠組織計量的影響

附表

與模型對照組相比，表示p＜0.05，表示p＜0.01。

附表3.壯腰健腎丸、舒筋健腰丸對老齡去勢雄性大鼠組織計量的影響

附表3

與模型對照組相比，表示p＜0.05，表示p＜0.01。

該試驗的骨組織形態計量學顯示：模型組雌雄大鼠均表現出骨小梁面積百分數、骨小梁數目明顯減少，骨小梁分離度明顯增大，雌、雄性大鼠的骨小梁厚度都有減少的趨勢。該試驗結果提示雌雄老齡大鼠去勢後成功地複製了骨質疏鬆症模型。經治療後，壯腰健腎丸高劑量組雌性骨質疏鬆大鼠的骨小梁面積百分數、骨小梁厚度明顯增加，骨小梁數目有增加趨勢和骨小梁分離度有減少的趨勢；壯腰健腎丸低劑量組雌性骨質疏鬆大鼠的骨小梁數目明顯增加，骨小梁面積百分比有增加和骨小梁分離度有減少的趨勢；壯腰健腎丸低劑量組雄性骨質疏鬆大鼠的骨小梁厚度明顯增加；試驗結果提示壯腰健腎丸高劑量、舒筋健腰丸低劑量能減少雌性大鼠去勢所引起的骨丟失，改善骨小梁的形態，起到的骨質疏鬆症的目的。

對SD大鼠骨生物力學的影響

1.材料與儀器

YLS-16A小動物骨骼強度測定儀，山東省醫學科學院設備站生產。

2.方法與結果

從-20℃冰櫃中取出股骨、脛骨和腰椎骨，室溫自然解凍。方法：使用YLS-16小動物骨骼強度測定儀依照使用說明進行下列測定：①左側股骨最大荷載測試（三點彎曲試驗）。③左側脛骨骨最大荷載測試（三點彎曲試驗）。每個樣本放置在儀器上的位置及方向保持一致。試驗結果（附表4、5）：

附表4.壯腰健腎丸、舒筋健腰丸對老齡去勢雌性大鼠生物力學指標

附表4

與模型對照組相比，表示p＜0.05，表示p＜0.01。

附表5.壯腰健腎丸、舒筋健腰丸對老齡去勢雄性大鼠生物力學指標

附表5

與模型對照組相比，表示p＜0.05，表示p＜0.01。

試驗結果（附表4、5）表明在該實驗中，模型組雄性大鼠的股骨、脛骨彎曲試驗最大負荷均顯著低於偽手術組，表明雄性大鼠去勢後可導致大鼠骨生物力學性能的降低；與模型組相比，壯腰健腎丸高、低劑量組雄性大鼠左側股骨、脛骨彎曲試驗（折斷）的最大荷載有增加的趨勢。

以上試驗結果表明：壯腰健腎丸、舒筋健腰丸均有一定的提高骨質疏鬆大鼠血清鈣、磷含量的作用，提高骨形成指標鹼性磷酸酶，降低骨吸收的指標羥脯氨酸、抗酒石酸酸性磷酸酶的作用；從生物力學試驗也表明壯腰健腎丸高劑量組雄性大鼠左側股骨彎曲試驗中最大荷載有增加的趨勢；從組織計量學看，壯腰健腎丸高劑量組明顯提高雌性大鼠骨小梁面積百分比及骨小梁的厚度。因此，從給藥後動物的組織計量學、生物力學以及試驗中測試的眾多指標綜合分析，在該試驗條件下，對12月齡的老齡SD大鼠去勢所致的骨質疏鬆經壯腰健腎丸、舒筋健腰丸14周的給藥後的表現出一定的抗骨質疏鬆的作用，其中壯腰健腎丸高劑量組的作用強於其它給藥劑量組，壯腰健腎丸的抗骨質疏鬆作用亦優於陽性藥仙靈骨葆膠囊。具體實施例如下所示：

實施例1

狗脊600克、黑老虎360克、千斤拔144克、桑寄生180克、女貞子30克、雞血藤360克、金櫻子192克、牛大力240克、菟絲子30克。

取狗脊、雞血藤、金櫻子、千斤拔、黑老虎（木部）加水煎煮二次，合併煎液，濾過，濾液濃縮成稠膏；黑老虎（皮部）與其餘桑寄生等四味粉碎成粗粉，加入上述稠膏，混勻，乾燥，粉碎成細粉，過篩，混勻；每100克粉末用煉蜜115～135克製成大蜜丸；或每100克粉末用煉蜜50～60克，用適量水泛丸，製成水蜜丸。

實施例2

狗脊600克、黑老虎360克、千斤拔144克、桑寄生180克、女貞子30克、雞血藤360克、金櫻子192克、牛大力240克、菟絲子30克。

取狗脊、雞血藤、金櫻子、千斤拔、黑老虎（木部）加水煎煮二次，合併煎液，濾過，濾液濃縮成稠膏；黑老虎（皮部）與其餘桑寄生等四味粉碎成粗粉，加入上述稠膏，混勻，乾燥，粉碎成細粉，過篩，混勻；加入適量硬脂酸鎂，用壓片機壓製成片劑。

實施例3

狗脊600、黑老虎360克、千斤拔144克、桑寄生180克、女貞子30克、雞血藤360克、金櫻子192克、牛大力240克、菟絲子30克、延胡索26克、兩面針26克、乳香12克、沒藥20克。

取狗脊、金櫻子、雞血藤、千斤拔、黑老虎（木部）加水煎煮二次，濾過，合併濾液，濃縮成稠膏；其餘牛大力等八昧及黑老虎（皮部）共粉碎成粗粉，加入上述稠膏，混勻，乾燥，粉碎成細粉，過篩，混勻；每100克粉末用煉蜜35～40克，用適量的水泛丸製成水蜜丸。

實施例4

狗脊600克、黑老虎360克、千斤拔144克、桑寄生180克、女貞子30克、雞血藤360克、金櫻子192克、牛大力240克、菟絲子30克、延胡索26克、兩面針26克、乳香12克、沒藥20克。

取狗脊、金櫻子、雞血藤、千斤拔、黑老虎（木部）加水煎煮二次，濾過，合併濾液，濃縮成稠膏；其餘牛大力等八味及黑老虎（皮部）共粉碎成粗粉，加入上述稠膏，混勻，乾燥，粉碎成細粉，過篩，混勻；將粉末裝入膠囊，製成膠囊劑。

榮譽表彰

2018年12月20日，《一種中藥組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的套用》獲得第二十屆中國專利獎優秀獎。