《γδT細胞通過IL-17調控CRSwNP組織中嗜酸性粒細胞浸潤的機制》是依託中山大學，由張革化擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：γδT細胞通過IL-17調控CRSwNP組織中嗜酸性粒細胞浸潤的機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張革化
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
嗜酸性粒細胞（Eos）浸潤與慢性鼻-鼻竇炎伴鼻息肉（CRSwNP）的預後密切相關，而鼻黏膜局部Eos浸潤的調控機制不明。我們前期發現：γδT細胞在CRSwNP中表達最高，且與Eos浸潤程度正相關。新近發現IL-17是銀屑病皮損中γδT細胞產生的重要致炎因子，據此推測：鼻黏膜局部γδ T細胞通過表達IL-17調控Eos浸潤。本項目擬通過組織標本檢測獲得CRSwNP鼻黏膜γδT細胞與IL-17直接相關的可靠證據；然後通過致炎因子激發Tcra-/-、Tcrd-/-小鼠，採用基因掃描技術確定鼻黏膜局部產IL-17的特異性γδT細胞亞群；最後通過同源γδ T細胞優勢亞群過繼轉移、特異性IL-17抗體封閉技術，證實特異性γδT細胞亞群通過IL-17調控Eos浸潤。本項目旨在闡明CRSwNP中以γδT細胞為核心的局部免疫應答機制，為完善CRSwNP發病理論，尋求新的局部治療方案，改善疾病預後提供科學依據
結題摘要
嗜酸性粒細胞浸潤（Eos）與慢性鼻-鼻竇炎伴鼻息肉（CRSwNP）預後密切相關，而鼻黏膜局部Eos浸潤調控機制不明。本項目首先通過組織標本檢測發現γδT和IL-17在EosCRSwNP中表達較其他組增高，鼻黏膜中γδT計數與Eos百分比正相關；通過流式雙標記TCRγδ及IL-17發現γδT細胞可分泌IL-17，且產IL-17的γδT在CRSwNP中高於其他組，明確了γδT和IL-17直接相關；其次，通過鼻黏膜組織上清液多因子檢測發現EosCRSwNP組Eos趨化因子eotaxin表達增高，鼻黏膜局部γδT與Eos浸潤正相關；通過qRT-PCR檢測明確了Vγ1+γδT與Eos陽離子蛋白ECP表達正相關，提示γδT可能參與嗜酸性粒細胞趨化；3.為明確γδT是否產生IL-17，通過CRSwNP、CRSsNP及對照鼻黏膜組織單細胞懸液流式細胞檢測發現產IL-17的細胞主要有Tc細胞（Tc17）、Th細胞（Th17）和γδT細胞（γδT17），且Tc17和γδT17在息肉中的表達高於對照組，Th17表達在各組見無明顯差異；產IL-17最多的細胞是Tc細胞；基於文獻報導γδT主要在炎症早期發揮作用，現有樣本源自手術病人，炎症持續時間長，不能準確反映炎症早期γδT產LL-17的情況，擬運用小鼠模型，在致炎早期檢測鼻黏膜中IL-17的表達，闡明γδT是炎症早期IL-17的主要來源；4.為明確γδT通過產IL-17促Eos浸潤，成功構建了Eos浸潤型CRS小鼠模型，擬聯合TCRγ及IL-17抗體封閉處理/不處理、IL-17刺激處理，明確γδT通過IL-17促Eos趨化；並培養了人原代鼻黏膜上皮細胞和γδT，擬通過兩種細胞共培養及IL-17刺激人原代鼻黏膜上皮細胞證實γδT通過IL-17促上皮細胞分泌Eos趨化因子，佐證動物實驗。5.研究還發現EosCRSwNP以黏膜水腫為主要特徵，MMP9表達增高；IL-17可促進人原代鼻黏膜上皮細胞分泌MMP9，提示γδT可能通過產生IL-17促進息肉間質水腫形成；6.γδT與EosCRSwNP中Th2型炎症因子增高有關，提示γδT還可能間接促進Th2炎症因子分泌促進Eos趨化，體外機制研究尚在進行；通過臨床隨訪觀察發現γδT及Eos高表達與CRSwNP不良預後有關。如上研究將完善γδT促Eos浸潤機制，為開發CRSwNP治療靶點提供依據。
