saRNA在肝癌發生模型中靶向活化p16INK4a的表觀遺傳機制研究

《saRNA在肝癌發生模型中靶向活化p16INK4a的表觀遺傳機制研究》是依託西安交通大學，由姚嘉宜擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：saRNA在肝癌發生模型中靶向活化p16INK4a的表觀遺傳機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：姚嘉宜
• 依託單位：西安交通大學

中文摘要

表觀遺傳調控異常在腫瘤發生過程中起關鍵性的作用。我們之前發現p16INK4a的組蛋白異常調控是肝癌產生過程中的重要標記。因此，靶向改變肝癌發生過程中的p16INK4a表觀遺傳學調控方式可以在肝癌早期阻抑腫瘤發生。近年來發展起來的小激活性RNA(saRNA)通過調節組蛋白修飾誘導基因活化，可以實現定點激活內源性基因表達。在本研究中，我們擬設計靶向p16INK4a的saRNA（saRNA-p16INK4a）以活化肝癌中失活的p16INK4a基因，實現表觀遺傳水平上的轉錄調控；通過觀察激活該基因而誘發的腫瘤細胞生長影響，評估saRNA-p16INK4a在肝癌發生過程中的抑癌作用。研究意義：1、建立肝癌特異性基因治療新手段，為saRNA在肝癌發生早期靶向治療提供有效的工具；2、P16INK4a基因作為腫瘤中的表觀遺傳管家基因，套用saRNA活化信號轉導通路可能形成肝癌基因治療的新生物藥物。

結題摘要

表觀遺傳調控異常在腫瘤發生過程中起關鍵性的作用。我們之前發現p16INK4a的組蛋白異常調控是肝癌產生過程中的重要標記。因此，靶向改變肝癌發生過程中的p16INK4a表觀遺傳學調控方式可以在肝癌早期阻抑腫瘤發生。近年來發展起來的小激活性RNA(saRNA)通過調節組蛋白修飾誘導基因活化，可以實現定點激活內源性基因表達。在本研究中, 我們設計靶向p16INK4a的saRNA（saRNAp16INK4a）以活化肝癌中失活的p16INK4a基因，實現表觀遺傳水平上的轉錄調控；通過觀察激活該基因而誘發的腫瘤細胞生長影響，評估saRNA-p16INK4a在肝癌發生過程中的抑癌作用。在本研究中，將p16INK4a－saRNA 導入到分化中的腫瘤細胞中，發現除了p16INK4a表達上調外，腫瘤抑制基因P53, P21, P19, Bax, Mgmt也隨著分化程度的發展而表達上調，saRNA可以逆轉原本的腫瘤基因表達趨勢；檢測p16INK4a 啟動子部位，saRNA可以降低P16啟動子上H3K27三倍甲基化程度，同時特異性降低了P16CpG島甲基化的程度；在體外細胞實驗中，SaRNA組可以明顯降低腫瘤的增殖能力，誘導腫瘤細胞凋亡，以及降低細胞活力；同時，在體內成瘤實驗中，saRNA組可以明顯降低腫瘤再體內的生長能力。結論，針對於p16INK4a設計的saRNA可以改變腫瘤細胞的基因表達模式，表觀遺傳調控方式，從而改變了腫瘤細胞體內及體外的增殖潛能，降低了腫瘤源性。研究意義：1、建立肝癌特異性基因治療新手段，為saRNA在肝癌發生早期靶向治療提供有效的工具；2、P16INK4a基因作為腫瘤中的表觀遺傳管家基因，套用saRNA活化信號轉導通路可能形成肝癌基因治療的新生物藥物。