《piRNA-823通過調控自噬途徑促進多發性骨髓瘤疾病進展的研究》是依託華中科技大學，由吳秋玲擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：piRNA-823通過調控自噬途徑促進多發性骨髓瘤疾病進展的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：吳秋玲
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
目前多發性骨髓瘤（MM）仍難以治癒，探索其新的頑固性進展機制非常重要。piRNA是一種新型非編碼小RNA，通過與PIWI蛋白特異性結合來自我擴增。piRNA特異性極強，在體細胞中不表達，近期被發現與腫瘤發生、預後不良關係密切而備受關注。我們今年在Leukemia上報導了piRNA-823在MM細胞中高表達，促進MM細胞增殖、抑制其凋亡，並與MM患者ISS分期呈正相關，提示piRNA-823可能是促進MM進展的新機制。自噬是近期發現的參與MM進展、耐藥的重要途徑，結合基因晶片的生物學信息分析結果和文獻報導，推測piRNA-823調控MM異常的關鍵通路極有可能是自噬途徑。因此，本課題擬從臨床、細胞、小鼠三個水平，系統驗證piRNA-823在促MM進展中的重要地位，同時研究它是否通過自噬途徑發揮作用，並從PIWI蛋白著手試圖找到調控piRNA的新方法，以期為MM疾病分層和治療提供一個新的靶標。
結題摘要
piRNA是一種新型非編碼小RNA，可與PIWI蛋白特異性結合自我擴增。研究發現piRNA與腫瘤發生髮展密切相關。本課題組之前在Leukemia上報導了piRNA-823在MM細胞中高表達，並與MM患者分期呈正相關，提示piRNA-823可能是促進MM進展的新機制。本研究中，我們分別對MM細胞系ARH77或RPMI8226轉染agomir-823，agomir-823-NC，antagomir-823，antagomir-823-NC，改變MM細胞中的piRNA-823的表達水平，探討piRNA-823在MM中的作用機制。研究結果顯示：上調piRNA-823促進MM細胞增殖，抑制細胞凋亡，且提高細胞自噬水平，表現為自噬小體數目增加，同時下調了p-mTOR、P62蛋白的表達，上調了p-AKT，LC3-II蛋白水平。在小鼠皮下移植瘤模型中上調piRNA-823組小鼠顯示出明顯的腫瘤生長，且小鼠皮下瘤組化顯示Ki-67、p-AKT、Bcl-2水平明顯升高，p-mTOR、p62水平明顯下降。而下調piRNA-823組與其陰性對照成現相反的結果。PIWIL1作為Argonaute蛋白家族的重要成員，在腫瘤細胞的生存和侵襲中起著關鍵作用。在本研究中，我們發現PIWIL1在MM細胞系和MM患者中高表達。然而，PIWIL1在MM中的確切功能和機制仍不清楚。我們利用慢病毒轉染人MM細胞系RPMI8226和NCL-H929，改變MM細胞中的PIWIL1的表達水平，來探討PIWIL1在MM中的作用機制。結果顯示：上調PIWIL1表達可促進MM細胞增殖，增強對化療藥物的耐藥性，此外，上調PIWIL1的標達增強自噬體，尤其是線粒體自噬的形成，同時下調了p-mTOR、P62蛋白的表達，並上調了LC3-II與線粒體自噬相關的蛋白Parkin1、optineurin和p-tbk1的表達。在小鼠體內皮下移植瘤模型中，注射過表達PIWIL1的細胞的小鼠顯示出明顯的腫瘤生長。過表達PIWIL1後MM細胞中側群細胞比例增加。而下調PIWIL1表達後以上實驗結果呈現相反的趨勢。綜上所述，piRNA-823通過調節自噬和凋亡雙通道影響MM進展；干擾PIWIL1可通過抑制線粒體自噬和靶向MM幹細胞群促進細胞死亡來克服耐藥。piRNA-823和PIWIL1可望作為靶點來開發新的MM治療策略
