p53AIP1增進以p53為靶點的腫瘤基因治療效果的機制研究

《p53AIP1增進以p53為靶點的腫瘤基因治療效果的機制研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由姜雲波擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：p53AIP1增進以p53為靶點的腫瘤基因治療效果的機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：姜雲波
• 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院

中文摘要

以p53為靶點的腫瘤生物治療策略，具有重要的發展潛力。國際上第一個獲得正式批准的基因治療藥物- - 今又生，就是重組人p53腺病毒注射液，為廣大腫瘤患者帶來了希望。如何進一步提升該類藥物的抗腫瘤效果，成為當前的研究熱點和難點。本人長期從事p53下游促凋亡基因p53AIP1的基礎研究，在國際上首次發現p53AIP1能夠反向上調其上游基因p53的表達，改變了傳統中已經形成的p53AIP1是p53下游調控基因的觀念。為以p53為靶點的腫瘤基因治療的增效，提供了新的線索和契機。我們前期初步研究了p53AIP1反向調控p53表達的相關機制發現，p53AIP1主要通過負調控MDM2的表達，來反向上調其上游基因p53的表達。但更確切的調控機制尚不明確，需要進一步深入探討和研究。該研究對提高以p53為靶點的腫瘤基因治療效果，將具備重要的指導意義。並為豐富p53調控網路，做出新的基礎理論貢獻。

結題摘要

1、 項目背景 p53AIP1是p53下游調控基因，在介導p53依賴性凋亡通路中起到重要的作用，是一個具有巨大潛力的治療靶標，p53AIP1有望增強以p53為靶點的腫瘤基因治療效果。我們在前期研究中發現p53AIP1能夠反向上調其上游基因p53的表達，並發現p53AIP1能夠通過負向調控MDM2的表達，進而反向上調p53蛋白的表達。但是，p53AIP1如何具體反向調控p53的表達作用機制仍需進一步的研究。 2、 研究內容 進一步驗證p53AIP1對p53和MDM2表達的調控；p53AIP1對p53蛋白穩定性作用研究；p53AIP1調控MDM2對p53蛋白的泛素化研究；p53AIP1基因siRNA干涉對p53和MDM2基因表達調控研究；MDM2基因siRNA干涉對p53AIP1調控p53基因表達作用研究；從轉錄水平研究p53AIP1對MDM2基因的作用機制；通過體內外實驗驗證p53AIP1增效以p53為靶點的基因治療藥效學研究。 3、 結果 p53AIP1對腫瘤細胞的生長抑制作用與腫瘤細胞自身p53基因的表達相關；p53AIP1能上調p53野生型細胞系的p53蛋白水平的表達；在人肝癌細胞系中驗證了p53AIP1反向上調p53蛋白表達的同時，負向調控MDM2的表達；在HeLa細胞中，通過轉染MDM2基因後，驗證了p53AIP1反向上調p53蛋白的表達與MDM2的表達相關；p53AIP1能夠提高p53蛋白穩定性；p53AIP1增效以p53為靶點的基因治療作用。 4、 關鍵數據 p53AIP1僅對p53野生型的細胞系具有明顯的生長抑制作用；Ad-p53AIP1能夠促進p53野生型的腫瘤細胞發生凋亡；Ad-p53AIP1感染HepG2和HeLa細胞後，其上游調控基因p53的蛋白表達量明顯增強，p53基因在RNA水平的表達沒有任何改變，MDM2的RNA和蛋白表達水平明顯降低；Ad-p53AIP1感染HepG2細胞後，p53AIP1有延長p53蛋白半衰期的作用；p53蛋白在siMDM2細胞中經過Ad-p53AIP1處理後，不再有表達上調的現象；體內外實驗發現， p53AIP1能夠促進p53對腫瘤細胞以及腫瘤組織生長的抑制作用。 5、 科學意義 p53AIP1能夠增強以p53為靶點的腫瘤基因治療效果，同時還為豐富p53的調控網路做出了基礎理論貢獻，為p53為靶點的增效提供了理論支撐