《p53激活劑RITA及其類似物的設計、合成及抗腫瘤活性研究》是依託清華大學，由蔣宇揚擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：p53激活劑RITA及其類似物的設計、合成及抗腫瘤活性研究
- 依託單位：清華大學
- 項目負責人：蔣宇揚
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
惡性腫瘤是嚴重威脅人類健康的常見多發病，人類近50%惡性腫瘤發生了抑癌基因的p53的突變或失活，通過激活p53來抗腫瘤已成為近年來抗腫瘤藥物研發的熱點之一。三環噻吩類似物RITA具有良好的抗腫瘤功能，在p53(wt)腫瘤細胞中，它可重新激活p53，調控其下游諸多的調控因子，最終引起腫瘤細胞周期阻滯和凋亡；本項目以RITA為先導化合物，探索實用且高效合成RITA及其類似物的新路線，設計併合成一系列RITA的類似物，並篩選其抗腫瘤的生物活性，研究其構效關係；通過最佳化RITA的類似物結構，獲得結構新穎、毒副作用小，選擇性好且抗腫瘤活性較RITA好的化合物；深入研究RITA及其類似物抗腫瘤作用，以期發現其抗腫瘤作用的新機制。同時探究RITA及其類似物的藥效學與藥動學性質，進行這類化合物的臨床前研究。本項目的成功研發，將為以p53為靶點性抗腫瘤藥物的研發提供新的研究思路和實驗依據。
結題摘要
腫瘤抑制基因p53在調控細胞周期、DNA修復、細胞凋亡和衰老等方面扮演著中心轉錄因子的角色。MDM2（鼠雙微基因2）是p53基因的一個主要負調節者，它與p53的N-末端結合，抑制其轉錄活性。此外，miR-34a是p53下游的一個直接效應因子，它在腫瘤組織中的表達較正常組織的低，恢復miR-34a的表達可調控其下游與腫瘤的發生、發展有關的直接效應因子（CDK4，E2F1等）的表達，進而誘導腫瘤細胞凋亡或衰老、阻滯細胞周期。在含野生型p53（wtp53）的人類腫瘤細胞中，設計能阻斷p53-MDM2相互作用的小分子來重新p53通路，是一種很有前途的治療含wtp53腫瘤的策略。 三環噻吩類化合物RITA在許多含野生型p53的腫瘤細胞中能夠干擾p53-MDM2的相互作用，重新激活p53，進而阻滯腫瘤細胞周期、誘導腫瘤細胞凋亡。本項目以RITA作為先導化合物，探索了合成RITA及其類似物的新方法，實用且高收率地合成了RITA及其類似物，此方法便於實現RITA及其類似物的工業化。 採用MTT法檢測了RITA及其類似物抗增殖活性，結果顯示它們對含p53(wt)的HCT116、MCF-7、A549和K562等細胞具有明顯的抑制活性，而對HCT116 TP53-/-活性較低，且多個類似物的活性優於或接近於先導化合物RITA（其中代表性化合物1f在MCF-7的IC50為28 nM，而RITA為54 nM）。綜合這些數據，初步探討了RITA及其類似物的構效關係。除此之外，100 nM的RITA和化合物1f在HCT116中可以明顯地激活p53的表達。在HCT116細胞，我們發現RITA及其化合物1f（400 nM）通過上調miR-34a的表達（RT-PCR），下調其下游靶蛋白E2F1、CDK4的表達，誘導腫瘤細胞周期阻滯於G0/G1，最終以p53依賴的方式誘導腫瘤細胞凋亡。1f在人肝微粒體中具有一定的穩定性，半衰期40.5分鐘。另外，代謝組學研究表明RITA通過干擾磷脂和嘌呤的代謝，抑制細胞的生長，達到抗腫瘤的作用效果。本項目的研究成果已發表SCI論文10篇，會議論文1篇，申請國家發明專利2項。本項目對以 p53 為靶點性抗腫瘤藥物的研發提供新的研究思路和實驗依據。
