《p53介導遊離棉酚致鯉肝臟中毒的分子機制研究》是依託河南師範大學，由梁俊平擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：p53介導遊離棉酚致鯉肝臟中毒的分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：梁俊平
- 依託單位：河南師範大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
p53是在細胞凋亡和細胞周期中發揮重要調控作用的一種轉錄因子。在p53介導下，游離棉酚(free gossypol，FG)可誘導人類癌細胞凋亡，引起癌細胞周期阻滯。在鯉中，FG不僅可誘導鯉肝細胞發生凋亡，也可引起肝細胞周期異常。但在此過程中，p53所發揮的調控功能尚不清楚。本項目在已獲得鯉p53及其下游靶基因部分序列基礎上，從在體和離體水平，綜合採用RNAi、Real-time PCR、Western-blot、DNA直接測序法、高效液相色譜檢測和流式細胞分析等技術，明晰p53對鯉肝細胞凋亡和細胞周期的調控功能；揭示FG毒理動力學特徵與肝細胞中毒的關係；從基因突變、mRNA轉錄、蛋白翻譯和蛋白修飾水平闡明p53對FG的應答機理，並解析p53與下游靶基因在FG致肝中毒過程中表達模式的相關性。預期研究結果可從分子水平揭示FG對鯉的致毒機制，為研發魚類FG解毒新技術提供理論依據。
結題摘要
p53是在細胞凋亡和細胞周期中發揮重要調控作用的一種轉錄因子。在p53介導下，游離棉酚可誘導人類癌細胞凋亡，引起癌細胞周期阻滯。棉粕作為水產飼料中重要蛋白來源之一，但其含有的游離棉酚對魚類毒性機制尚不完全清楚。本研究以鯉為研究對象，研究了p53在游離棉酚對鯉致毒中的作用機制。研究發現，游離棉酚在鯉體內“首過效應”較強，主要蓄積在肝臟和腎臟，血液中游離棉酚含量較低。鯉單次灌餵醋酸棉酚，短時間內引起了肝臟生理性變化，未引起肝臟病理性損傷以及肝細胞凋亡。不同劑量連續灌餵鯉游離棉酚，血清轉氨酶活性升高，肝臟腫大，肝細胞核直徑顯著增大，肝細胞出現凋亡，肝臟脂肪含量增加；游離棉酚誘導鯉p53高表達，通過激活下游Bax-caspase9-caspase3/caspase7和fas-caspase8-caspase3/caspase7兩條通路發生肝細胞凋亡。飼料中添加不同劑量游離棉酚投餵鯉8周后，鯉生長性能未受到影響，肝臟脂肪含量增加，肝臟一定程度受損，但未引起肝細胞凋亡。研究結果顯示，鯉對游離棉酚具有一定耐受性，游離棉酚對鯉肝臟致毒呈現濃度與時間依賴性，通過p53介導作用引起肝細胞凋亡，其凋亡過程可能受到營養與飢餓影響，在飢餓與投餌條件下游離棉酚均可引起鯉肝臟脂肪蓄積。本研究對進一步理解游離棉酚對魚類致毒機制，通過營養調控技術減弱游離棉酚毒性具有重要參考價值。
