《p32受體靶向納米粒包載MBD1siRNA治療胰腺癌淋巴轉移的研究》是依託復旦大學，由傅德良擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：p32受體靶向納米粒包載MBD1siRNA治療胰腺癌淋巴轉移的研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：傅德良
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
胰腺癌的淋巴結轉移與甲基化結合域蛋白MBD1的異常表達密切相關，我們前期研究發現siRNA沉默MBD1基因可以改變胰腺癌甲基化相關基因和蛋白的表達，尤以與胰腺癌淋巴轉移相關的蛋白表達變化更明顯；同時還證實PLGA生物降解納米粒作為MDB1siRNA基因治療載體的科學性、可行性和特殊的緩釋效果。本課題將承接既往研究結果，以MBD1為治療靶基因，PEG-PLGA共聚物為納米載體，線粒體/細胞表面蛋白p32/gC1qR為受體介導，合成新型的受體靶向納米基因治療緩釋系統- - LyP-1-MDB1siRNA-PEG-PLGA生物降解納米粒。通過體外實驗研究該系統對人胰腺癌細胞的靶向性和生物學行為影響，並以人胰腺癌淋巴轉移動物模型為平台，研究其主動靶向抑制胰腺癌淋巴轉移的療效和作用機理，探討LyP-1-PEG-PLGA納米粒作為受體淋巴靶向運載和基因治療載體的可行性和科學性。
結題摘要
研究背景及目的：胰腺癌的淋巴結轉移與甲基化結合域蛋白MBD1 的異常表達密切相關，我們前期研究發現siRNA 沉默MBD1 基因可以改變胰腺癌甲基化相關基因和蛋白的表達，尤以與胰腺癌淋巴轉移相關的蛋白表達變化更明顯。本課題將承接既往研究結果，以MBD1 為治療靶基因，MWNTs為納米載體，線粒體/細胞表面蛋白p32/gC1qR 為受體介導，合成新型的受體靶向納米基因治療緩釋系統- - LyP-1-MDB1siRNA-MWNTs生物納米粒。 方法和結果：1．LyP-1-MWNTs、MWNTs分散液穩定性觀察：所製成的LyP-1-MWNTs、MWNTs分散液均呈黑色，分散均勻，室溫下穩定性良好，靜置3個月後均未出現明顯沉澱。2．透射電鏡觀察：MWNTs呈長管狀，表面相對光滑，邊界相對清晰，管芯透明管壁不透明，長度100～200 nm；MWNTs枝接LyP-1多肽後，長管狀結構未發生改變。3. MTT法檢測胰腺癌細胞株生長抑制情況：GEM、MWNTs-GEM、LyP-1-MWNTs-GEM的細胞抑制率基本均具有明顯的時間依賴性，實驗組細胞株凋亡明顯。4. 流式細胞儀測定細胞凋亡結果顯示LyP-1-MWNTs-GEM組的胰腺癌細胞株BXPC-3-LN5的細胞凋亡率高於其他各組。5.動物移植瘤實驗表明，轉染MBD1siRNA 質粒的裸鼠移植瘤生長速度明顯較對照組減慢，且轉染組在MBD1 下調的同時，抑癌基因CDH-1 與Rb 的表達明顯上調。 結論與意義： LyP-1-MDB1siRNA-MWNTs在一定濃度時能依賴靶向效能顯著抑制BxPC-3-LN5細胞增殖，促進其凋亡。
