《neurotrophin-3激活HIF-1α促進腫瘤血管生成的分子機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由竇維佳擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：neurotrophin-3激活HIF-1α促進腫瘤血管生成的分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：竇維佳
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
新生血管形成與腫瘤發生、發展及預後密切相關。腫瘤細胞分泌多種細胞因子或蛋白，以旁分泌或自分泌的方式影響血管生成，新生血管-腫瘤細胞的生物學特徵使二者形成正反饋環路，但其關鍵分子及作用機制尚不明確。我們前期研究證實，與胃癌細胞共培養可增加血管形成能力，並成功篩選出可發揮促進神經元生長、誘導分化及維持穩定作用——神經營養因子3（NT-3）為促進腫瘤血管生成的關鍵因子。但是NT-3作為腫瘤分泌蛋白在胃癌，尤其是胃癌新生血管中作用尚不清楚。因此，本研究擬採用分子生物學方法①檢測胃癌組織及細胞中NT-3表達，明確其與胃癌相關性；②通過增加或降低細胞中NT-3表達，在體內外探討NT-3對胃癌新生血管生成作用；③ 闡明NT-3誘導PI3K/PTEN/AKT信號通路激活HIF-1α促進胃癌血管生成分子機制，及NT-3與HIF-1α作用關係，為揭示腫瘤細胞促進血管生成及抗腫瘤治療提供新的理論依劇。
結題摘要
胃癌作為消化系統最常見的惡性腫瘤，在亞洲國家位居所有腫瘤致死率的第二位，胃癌的發生髮展、預後不良與組織中血管生成密切相關。研究表明，血管生成發生於腫瘤組織形成的早期階段，是啟動腫瘤生長、侵襲、轉移的關鍵步驟。然而，促進血管生成的關鍵分子及作用機制尚不十分明確。前期試驗中我們採用共培養系統發現胃癌細胞可促進體外血管生成，通過收集細胞培養液上清，利用細胞因子晶片技術，篩選出神經營養因子-3（NT-3）作為促進血管生成的關鍵因子。NT-3是神經營養因子家族成員，近來研究發現其在多種腫瘤中發揮重要的調節作用。本研究採用多種分子生物學方法①發現NT-3在胃癌組織及細胞中表達顯著升高，且NT-3高表達水平與腫瘤分化程度、TNM分期、淋巴轉移及患者不良預後密切相關，而與患者的年齡及性別無關。另外，NT-3表達對胃癌具有一定的診斷價值；②MTT試驗顯示利用內源性過表達或外源性刺激NT-3均可促進胃癌細胞增殖；③雙螢光素酶報告基因表明miR-200c/b通過與NT-3的3’UTR結合調節NT-3表達，進一步分析顯示在胃癌組織中NT-3與miR-200c/b表達呈顯著負相關。另外，本研究還發現過表達NT-3後細胞中HIF-1α表達水平明顯增加，且PI3K/AKT信號通過被激活。利用siRNA技術下調過表達NT-3細胞中HIF-1α水平，發現胃癌細胞增殖能力顯著下降，且HIF-1α下游分子VEGF及MMP表達亦顯著降低。因此，本研究結果顯示NT-3在胃癌的發生髮展中發揮癌基因功能，且可被miR-200c/b調節並通過誘導HIF-1α激活發揮作用，這為闡明胃癌發生髮展、血管生成提供新的理論依據，為治療腫瘤提供新的分子靶點。
