nNCBT在雌性生殖中作用的研究

《nNCBT在雌性生殖中作用的研究》是依託華中科技大學，由劉穎擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：nNCBT在雌性生殖中作用的研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：劉穎
• 依託單位：華中科技大學

中文摘要

SLC4基因家族的鈉離子偶聯碳酸氫根轉運蛋白NCBT-包括生電性的eNCBT和電中性的nNCBT-是機體主要的pH調控蛋白及碳酸氫根離子跨膜運輸的主要載體。碳酸氫根對於雌性生殖道中發生的精子獲能及頂體反應非常重要，從而對於受精過程起著重要作用。在前期研究中，本人從事了大量關於NCBT分子生理學的工作，包括新cDNA的克隆、表達分析和分子生理學功能的研究。在本課題中，我們將進一步把對NCBT的研究擴展到生殖學領域，探究nNCBT在雌性生殖中的表達及生理學作用。研究內容：（1）在mRNA及蛋白水平上研究nNCBT在雌性生殖道上皮細胞中的表達，及所表達的剪下異構體；（2）以蛙卵為表達體系，以電生理學技術為主要手段，研究nNCBT剪下異構體的分子生理學活性；（3）利用基因敲除小鼠，研究nNCBT與雌性生殖的生理學相關性。本研究的結果將對於認識雌性生殖道碳酸氫根的分泌機制以及雌性不育具有重要意義。

結題摘要

SLC4基因家族的鈉離子偶聯碳酸氫根轉運蛋白NCBT是機體主要的pH調控蛋白及碳酸氫根離子跨膜運輸載體。碳酸氫根對於雌性生殖道中發生的精子獲能及頂體反應非常重要，從而對於受精過程起著重要作用。本課題主要研究電中性nNCBT在雌性生殖道中的表達及生理學作用。 在課題的研究過程中，我們主要在以下三個方面取得了比較重要的進展： （1）NCBT的功能基因組學 對編碼NBCe1，NBCn1及NBCn2的基因在雌性小鼠生殖道組織及其他組織中表達產物的多樣性進行了比較系統的研究，發現並克隆關於NBCe1，NBCn1和NBCn2的一系列新的表達產物異構體形式（在GenBank發表cDNA序列34個），大為豐富了我們關於對這些重要基因的表達產物多樣性的認識。 （2）HCO3–轉運體在雌性生殖道組中的表達分布及生理學作用 我們通過RT-PCR、蛋白印跡和免疫螢光等技術各種NCBT以及其他重要的HCO3–轉運體在雌性生殖道組中的表達與分布，並初步研究了NBCn1在雌性生殖道組織中的表達與雌性生殖周期的關係。 （3）NCBT的結構與功能研究。 我們對克隆的各種不同NBCn1剪接體的活性進行了分析，發現了NBCn1的兩個重要的增強轉運體活性的結構域。此外，通過與NBCe1的結構和活性的比較分析，我們對決定NBCe1的生電性相關的結構功能元件進行了探索。 通過本課題的工作，我們共發表SCI論文5篇，國核心心期刊論文1篇，會議論文6篇，此外還有一篇Journal of Physiology論文在審稿中。